Fluorescence detection

Details Fluorescence detection Fluorescence detection

G - Physics

01

N

G01N 21/64 (2006.01)

Patent

CA 2584186

A fluorescence detection system comprises a light source (22), dichroic mirror (32), excitation port (16), emission port (14), and a detector. The light source (22) is, for example, a pulsed ultraviolet LED, with a light emission that decays sufficiently rapidly to permit gated detection of fluorescence from a fluorescently-labelled species, at a time when it is distinguishable from autofluorescence. The detector is, for example, an electron multiplying CCD, with high gain on- chip amplification. A circuit (26) may be used to control a repeating cycle of (i) generation of a 20-200 microsecond UV. pulse; (ii) a gate delay of 1-5 microseconds; and (iii) a 10-800 microsecond detection period. This allows time- resolved-fluorescence-microscopy with real time or near real time operation.

La présente invention concerne un système de détection par fluorescence comprenant une source lumineuse (22), un miroir dichroïque (32), un port d~excitation (16), un port d~émission (14) et un détecteur. La source lumineuse (22) est, par exemple, une DEL à ultraviolets pulsés dont l~émission lumineuse se désintègre suffisamment rapidement pour permettre la détection synchronisée de la fluorescence par des espèces marquées par fluorescence, à un moment où elle peut être distinguée de l~autofluorescence. Le détecteur est, par exemple, un capteur CCD multiplicateur d~électrons avec une forte amplification sur puce. Un circuit (26) peut être utilisé pour commander un cycle répétitif de (i) génération d~impulsions des ultraviolets de 20 à 200 microsecondes ; (ii) un retard de porte de 1 à 5 microsecondes et (iii) une période de détection de 10 à 800 microsecondes. Cela permet d~obtenir une microscopie à résolution temporelle fonctionnant en temps réel ou presque.

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