Fluorescence polarization-based homogeneous assay for...

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/542 (2006.01) G01N 33/10 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2422089

a homogeneous assay for determining the deoxynivanlenol (DON) content in grains uses the technique of fluorescence polarization. A grain extract is prepared by shaking a crushed grain sample with water. A mixture is prepared by combining the grain extract with a tracer and with monoclonal antibodies specific to DON. The tracer is able to bind to the monoclonal antibodies to produce a detectable change in fluorescence polarization. The tracer is prepared by conjugating DON to a suitable fluorophore. The fluorescence polarization of the mixture is measured. The DON concentration of the mixture may be calculated using a standard curve obtained by measuring the fluorescence polarization of a series of DON solutions of known concentration.

La présente invention concerne un essai homogène servant à déterminer le teneur de céréales en désoxynivalénol (DON), ledit procédé faisant intervenir la technique de polarisation de fluorescence. Un extrait de céréale est préparé grâce à l'agitation d'un mélange d'un échantillon de céréale écrasée avec de l'eau. Un mélange est préparé par combinaison de l'extrait de céréale avec un traceur et avec des anticorps monoclonaux spécifiques du DON. Le traceur est capable de se lier aux anticorps monoclonaux pour produire une modification décelable de la polarisation de fluorescence. Le traceur est préparé par conjugaison du DON avec un fluorophore approprié. La polarisation de fluorescence du mélange est mesurée. La concentration en DON du mélange peut être calculée au moyen d'une courbe normalisée obtenue grâce à la mesure de la polarisation de fluorescence d'une série de solutions de DON de concentration connue.

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