C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/10 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2569486
It is intended to, through preparation of a cellular gene expression profile from an extremely small number of cells, realize application to pathological samples, microtissues, microanimals, etc. whose handling has been infeasible because of a limited sample amount and further realize a gene expression profile as to cells of peripheral blood for use in pathological diagnosis, etc. There is provided a method attaining improvement to the high coverage expression profiling analysis (HiCEP) disclosed in the pamphlet of WO 02/48352, characterized in that the amount of mRNA contained in a starting material is increased through obtaining amplified RNA complementary to double strand cDNA sequence by the action of RNA polymerase, and that the number of double strand cDNAs having an X primer and Y primer added thereto is increased by the use of PCR.
Il est tenté, par la préparation d'un profil d'expression de gène cellulaire à partir d'un très petit nombre de cellules, de réaliser une application à des échantillons pathologiques, des micro-tissus, des micro-animaux, etc. dont la manipulation était irréalisable du fait d'une taille limitée d'échantillon, et également de réaliser un profil d'expression génique pour des cellules de sang périphérique pour une utilisation dans des diagnostics pathologiques, etc. Il est proposé un procédé parvenant à améliorer l'analyse de profilage de l'expression à haute couverture (HiCEP) fourni dans le pamphlet de la demande WO 02/48352, caractérisé en ce que la quantité d'ARNm contenu dans un matériau de départ est augmentée par obtention d'ARN amplifié complémentaire à la séquence d'ADNc bicaténaire par l'action de l'ARN polymérase, et que le nombre d'ADNc bicaténaire ayant une amorce X et une amorce Y ajoutées à celui-ci est augmenté par l'utilisation de PCR.
Abe Masumi
Araki Ryoko
National Institute Of Radiological Sciences
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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