G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/49 (2006.01) G01N 15/10 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)
Patent
CA 2232163
The invention provides a very fast and reliable method and reagent composition for determining reticulocyte and erythrocyte counts, identification and characterization, as well as platelet counts, in a whole blood sample using fully automated hematology analyzers. The reagent composition includes a zwitterionic surfactant as sphering agent for reticulocytes and erythrocytes, an organic cationic dye, e.g., Oxazine 750, for staining the reticulocytes, and buffer solution components for maintaining a reagent pH of about 7.2 to 7.8, and an osmolality of about 292 ~ 5. On the basis of the particular pH, ionic strength, and dye concentration, the reagent composition of the present method improves upon previous methods, thus allowing fully automated blood sample analyses to be completed in less than about 30 seconds, with only about a 20 second incubation of sample in the reagent solution before analysis. With such a rapid incubation time, the reagent mixture is passed through the sensing region of a flow cytometer, and the light scattered and absorbed by each cell is rapidly measured to provide accurate cell determinations and counts. The volume and hemoglobin concentration and content of each erythrocyte or reticulocyte are determined. Mean cell volume, mean corpuscular hemoglobin concentration, and mean cell hemoglobin of the reticulocytes and/or erythrocytes are calculated from the measured cell-by-cell volume and hemoglobin concentration.
L'invention propose une méthode très rapide et très fiable et une composition réactive pour effectuer la numération, l'identification et la caractérisation des réticulocytes et des érythrocytes, ainsi que la numération plaquettaire dans un échantillon de sang total au moyen d'un analyseur hématologique entièrement automatisé. La composition réactive comprend un surfactant zwittérionique comme agent de sphéroïdisation pour les réticulocytes et les érythrocytes, et un colorant organique cationique, p. ex. l'Oxazine 750, pour colorer les réticulocytes, et des solutions tampons pour maintenir le pH du réactif autour de 7,2 à 7,8, et une osmolalité d'environ 292~5. Si l'on se fonde sur le pH particulier, la force ionique et la concentration du colorant, la composition réactive de la présente méthode constitue une amélioration par rapport aux méthodes antérieures, ce qui permet d'effectuer des analyses entièrement automatisées des échantillons sanguins, en moins de 30 secondes, après une période d'incubation de l'échantillon dans la solution réactive avant l'analyse d'environ 20 secondes seulement. Après une période d'incubation aussi courte, la solution réactive passe devant le capteur d'un cytomètre de flux, et la lumière diffusée et absorbée par chaque cellule est rapidement mesurée pour effectuer avec exactitude la détermination et la numération des cellules. On détermine le volume, la concentration et la teneur en hémoglobine et la concentration de chaque érythrocyte ou réticulocyte. Le volume cellulaire moyen, la concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine et la teneur globulaire moyenne en hémoglobine des réticulocytes et/ou des érythrocytes sont calculés à partir du volume et de la concentration en hémoglobine, mesurés cellule par cellule.
Paseltiner Lynn
Sorette Martin P.
Zelmanovic David
Corporation Bayer
Macrae & Co.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1359905