Fusion proteins comprising a dimerization, trimerization or...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/67 (2006.01) A61K 38/18 (2006.01) C07K 14/035 (2006.01) C07K 14/39 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

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CA 2300376

The present invention relates to novel fusion proteins which activate transcription, to nucleic acid constructs encoding the proteins and their use in the genetic engineering of cells. Key fusion proteins of the invention contain at least two mutually heterologous domains, one of which being a bundling domain. Bundling domains include any domain that induces proteins that contain it to form multimers ("bundles") through protein-protein interactions with each other or with other proteins containing the bundling domain. Examples of bundling domains that can be used in the practice of this invention include domains such as the lac repressor tetramerization domain, the p53 tetramerization domain, a leucine zipper domain, and domains derived therefrom which retain observable bundling activity. Cells are engineered by the introduction of recombinant nucleic acids encoding the fusion proteins, and in some cases with additional nucleic acid constructs, to render them capable of ligand-dependent regulation of transcription of a target gene. Administration of the ligand to the cells then regulates (positively, or in some cases, negatively) target gene transcription.

L'invention concerne des protéines de fusion nouvelles qui activent la transcription, des constructions d'acides nucléiques codant lesdites protéines et leur utilisation dans le génie génétique des cellules. Ces protéines clés renferment au moins deux domaines mutuellement hétérologues, dont l'un est un domaine d'assemblage en faisceaux. Ce type de domaine comprend tout domaine conduisant les protéines qui le renferment à constituer des multimères ("faisceaux") par interactions mutuelles protéine-protéine ou par interaction avec d'autres protéines contenant le domaine en question. Parmi les exemples de domaines d'assemblage en faisceaux pouvant être utilisés aux fins de l'invention figurent des domaines comme le domaine de tétramérisation inhibiteur de lac, le domaine de tétramérisation p53, un domaine de type "leucine zipper", et les domaines dérivés qui conservent une activité observable d'assemblage en faisceaux. Les opérations de génie génétique des cellules consistent à introduire dans ces cellules des acides nucléiques de recombinaison codant ces protéines de fusion et, dans certaines cas, par le biais de constructions d'acides nucléiques supplémentaires, à rendre lesdites cellules capables d'assurer une régulation dépendante du ligand pour la transcription d'un gène cible. Le fait d'administrer le ligand aux cellules régule alors (positivement ou, parfois, négativement) la transcription des gènes cibles.

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