Gene disruption methodologies for drug target discovery

Details Gene disruption methodologies for drug target discovery Gene disruption methodologies for drug target discovery

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/10 (2006.01) C07K 14/37 (2006.01) C07K 14/40 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2432902

The present invention provides methods and compositions that enable the experimental determination as to whether any gene in the genome of a diploid pathogenic organism is essential, and whether it is required for virulence or pathogenicity. The methods involve the construction of genetic mutants in which one allele of a specific gene is inactivated while the other allele of the gene is placed under conditional expression. The identification of essential genes and those genes critical to the development of virulent infections, provides a basis for the development of screens for new drugs against such pathogenic organisms. The present invention further provides Candida albicans genes that are demonstrated to be essential and are potential targets for drug screening. The nucleotide sequence of the target genes can be used for various drug discovery purposes, such as expression of the recombinant protein, hybridization assay and construction of nucleic acid arrays. The uses of proteins encoded by the essential genes, and genetically engineered cells comprising modified alleles of essential genes in various screening methods are also encompassed by the invention.

L'invention concerne des procédés et des compositions qui permettent de déterminer de manière expérimentale si un gène quelconque du génome d'un organisme pathogène diploïde est essentiel, et si ce gène est déterminant pour la virulence ou la pathogénicité. Ces procédés comprennent la construction de mutants génétiques dans lesquels un allèle d'un gène spécifique est inactivé tandis que l'autre allèle de ce gène est soumis à une expression conditionnelle. Cette identification des gènes essentiels et des gènes déterminants pour le développement d'infections virulentes, constitue une base pour la mise au point de cribles permettant la sélection de nouveaux médicaments contre de tels organismes pathogènes. L'invention concerne en outre des gènes de Candida albicans qui se sont révélés essentiels et qui sont des cibles potentielles pour l'identification de nouveaux médicaments. La séquence nucléotidique des gènes cibles peut être utilisée dans divers procédés permettant l'identification de médicaments, telles que l'expression de la protéine recombinée, les tests d'hybridation et la création de puces d'acide nucléique. L'invention concerne également les utilisations des protéines codées par les gènes essentiels, et des cellules obtenues par génie génétique contenant des allèles modifiés de ces gènes essentiels, dans divers procédés de criblage.

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