Gene expression in mammalian cells

Details Gene expression in mammalian cells Gene expression in mammalian cells

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/85 (2006.01) A61K 38/18 (2006.01) A61K 38/21 (2006.01) C07K 14/505 (2006.01) C07K 14/565 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/22 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2216174

Proteins such as human .beta.-interferon or human erythropoietin are prepared by culturing mammalian cells which harbour a nucleic acid sequence comprising (i) a coding sequence which encodes the desired protein and which is operably linked to a promoter capable of directing expression of the coding sequence in a mammalian cell in the presence of a heavy metal ion; and (ii) a first selectable marker sequence comprises a metallothionein gene and which is operably linked to a promoter capable of directing expression of the metallothionein gene in a mammalian cell in the presence of a heavy metal ion; and optionally (iii) a second selectable marker sequence which comprises a neo gene and which is operably linked to a promoter capable of directing expression of the neo gene in a mammalian cell.

Des protéines comme l'interféron-bêta humain ou l'érythropoïétine humaine sont préparées par culture de cellules mammaliennes qui portent une séquence d'acide nucléique comprenant (i) une séquence codante qui code la protéine recherchée et qui est liée efficacement à un promoteur capable de diriger l'expression de la séquence codante dans une cellule mammalienne en présence d'un ion de métal lourd; et (ii) une première séquence de marqueur sélectionnable qui comprend un gène de métallothionéine et qui est liée efficacement à un promoteur capable de diriger l'expression du gène de métallothionéine dans une cellule mammalienne en présence d'un ion de métal lourd; et facultativement, (iii) une seconde séquence de marqueur sélectionnable qui comprend un néogène et qui est liée efficacement à un promoteur capable de diriger l'expression du néogène dans une cellule mammalienne.

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