C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/81 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01)
Patent
CA 2366069
The invention features a method for systematically generating mutant strains of obligate haploid and obligate diploid yeast, having condition-sensitive lethal mutations of a gene which is otherwise essential to cell viability under all conditions of cell growth. Conditional mutants make possible the analysis of physiological changes caused by inactivation of a gene or a gene product and can be used to address the function of any gene. In an exemplary embodiment, the method of the present invention can be generally characterized as follows: (i) providing a Candida strain whichis heterozygous for a loss-of- function mutation of an allele of an essential gene; and (ii) introducing a conditionally sensitive homolog of the gene, e.g., with conditional-sensitive protein or conditional-sensitive transcriptional regulatory sequence, at the functional allele by integrative transformation.
La présente invention concerne une technique permettant de générer de façon systématique des souches de mutant de levure d'haploïde et de diploïde obligatoires, dont les mutations létales d'un gène sont sensibles aux conditions, gène qui, par ailleurs, est essentiel à la viabilité cellulaire sous toutes les conditions de la croissance cellulaire. Les mutants conditionnels permettent l'analyse des changements physiologiques induits par l'inactivation d'un gène ou d'un produit génique et ils peuvent être utilisés pour solliciter la fonction d'un gène quelconque. Dans un mode de réalisation de l'invention, la technique consiste en général à: (i) prendre une souche de Candida hétérozygote en vue d'une mutation de perte de fonction d'un allèle de gène essentiel; (ii) et introduire un homologue conditionnellement sensible de ce gène, par exemple avec une protéine conditionnellement sensible ou une séquence de régulation de la transcription conditionnellement sensible, au niveau de l'allèle fonctionnel par transformation intégrative.
Berlin Vivian
Csank Csilla
Smith Susan E.
Sullivan Donald
Borden Ladner Gervais Llp
Gpc Biotech Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1906184