C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/00 (2006.01) C12N 5/02 (2006.01)
Patent
CA 2517295
The present invention it was determined that dendritic cells could be derived from various sources including peripheral blood monocytes in the presence of only GM-CSF without other cytokines if the monocytes were not activated. By preventing activation, such as by preventing binding of the cells to the surface of the culture vessel, the monocytes do not require the presence of additional cytokines, such as IL-4 or IL-13, to prevent differentiation into a non-dendritic cell lineage. The immature DCs generated and maintained in this manner were CD14- and expressed high levels of CD1a. Upon maturation by contact with an agent such as, for example, BCG and IFN.gamma., the cells were determined to express surface molecules typical of mature dendritic cells purified by prior methods and cultured in the presence of GM-CSF and IL-4. The mature dendritic cells produced from monoxytes without activation and cultured in GM-CSF alone are suitable for use in dendritic cell-based immunotherapy methods, such as for use in the treatment of disease, including cancer.
Selon la présente invention, les cellules dendritiques(DC) peuvent être dérivées de différentes sources parmi lesquelles figurent les monocytes du sang périphérique, en la seule présence du facteur GM-CSF, sans cytokines supplémentaires, si lesdits monocytes ne sont pas activés. Lorsque le processus d'activation est inhibé, ou lorsque l'on empêche la fixation des cellules sur la surface du récipient de culture, les monocytes ne nécessitent pas la présence de cytokines supplémentaires, telles que IL-4 ou IL-13, pour empêcher la différenciation vers une lignée cellulaire non dendritique. Les DC immatures générées et maintenues ainsi se présentent sous la forme de CD14?-¿ et expriment des niveaux élevés de CD1a. En outre, lors de leur maturation par contact avec un agent tel que le BCG ou l'IFN.gamma., les cellules expriment des molécules de surface typiques de cellules dendritiques matures, purifiées par des procédés antérieurs et mises en culture en présence du facteur GM-CSF et d'IL-4. Les cellules dendritiques matures produites à partir de monocytes sans activation et mises en culture en la seule présence du facteur GM-CSF peuvent être utilisées dans le cadre de procédés d'immunothérapie fondés sur des cellules dendritiques, ou peuvent être employées pour traiter des maladies parmi lesquelles figure le cancer.
Bosch Marnix L.
Tjoa Benjamin A.
Gowling Lafleur Henderson Llp
Northwest Biotherapeutics Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1387611