Generation of human cytotoxic t-cells specific for carcinoma...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/12 (2006.01) C12N 5/0783 (2010.01) A61K 35/14 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C12N 15/863 (2006.01)

Patent

CA 2213451

We have discovered that by using a recombinant DNA viral vector, preferably a pox virus vector having at least one insertion site containing a DNA segment encoding the carcinoma self-associated antigen, or a cytotoxic T-cell eliciting epitope thereof, operablylinked to a promoter capable of expression in the host, human cytotoxic T-cells specific for the carcinoma self- associated antigens can be produced. The method preferably comprises introducing a sufficient amount of the recombinant pox virus vector into a host to stimulate production of cytotoxic T-cells, and contacting the host with additional antigen at periodic intervals thereafter. The additional antigen may be added by using a second pox virus vector from a different pox genus. In another embodiment, additional antigen is added by contacting the host with antigen. The antigen may be formulated with an adjuvant or in a liposomal formulation. The T-cells can be isolated. The number of T-cells can be expanded by contacting the isolated cytotoxic T-cells alternately with the carcinoma self-associated antigen or an epitope thereof and IL-2. The isolated T-cells can be used in a method for treating a host having a tumor expressing a carcinoma self-associated antigen comprising introducing cytotoxic T-cells specific for the antigen to the host and at at least one periodic interval thereafter introducing to the host a T-cell eliciting epitope of the carcinoma self-associated antigen.

On a découvert qu'en utilisant un vecteur viral d'ADN recombiné, de préférence un vecteur viral de poxvirus présentant au moins un site d'insertion contenant un segment d'ADN codant l'antigène auto-associé à un carcinome ou son épitope faisant apparaître des lymphocytes T cytotoxiques, lié fonctionnellement à un promoteur capable d'une expression dans l'hôte, il est possible de produire des lymphocytes T humains cytotoxiques spécifiques des antigènes auto-associés à un carcinome. Le procédé consiste de préférence à introduire une dose suffisante du vecteur de poxvirus recombiné dans un hôte pour stimuler la production de lymphocytes T cytotoxiques, puis à mettre en contact l'hôte avec un antigène supplémentaire à intervalles périodiques. Ledit antigène supplémentaire peut être ajouté à l'aide d'un second vecteur de poxvirus tiré d'un autre genre de pox. Dans un autre mode de réalisation, on ajoute l'antigène supplémentaire en mettant en contact l'hôte avec l'antigène. Ledit antigène peut être formulé avec un adjuvant ou dans une formulation liposomique. On peut isoler les lymphocytes T. Le nombre de lymphocytes T peut être augmenté par mise en contact des lymphocytes T cytotoxiques isolés alternativement avec l'antigène auto-associé à un carcinome ou avec son épitope et l'IL-2. Les lymphocytes T isolés peuvent être utilisés dans un procédé de traitement d'un hôte présentant une tumeur exprimant un antigène auto-associé à un carcinome, consistant à introduire des lymphocytes T cytotoxiques spécifiques de l'antigène dans l'hôte, puis à introduire dans l'hôte, au moins après un intervalle périodique, un épitope faisant apparaître des lymphocytes T de l'antigène auto-associé à un carcinome.

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