Generation of multiple gene products from chimeric fusion...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/62 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/54 (2006.01) C07K 14/55 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)

Patent

CA 2333144

The present invention concerns materials and methods relating to the expression of genes. In particular, it relates to the expression of multiple gene products as a single cistron. The invention is achieved by constructing a nucleic acid construct comprising a first sequence encoding a first polypeptide (such as a protein subunit) and a second sequence encoding a second polypeptide (a further protein subunit), said first and second sequences being separated by a linker sequence encoding an endoprotease cleavage site. Once expressed as a single fusion protein it can be cleaved and processed into its constituent, biologically active, first and second polypeptides. The invention has particular implications with regard to expression of proteins that have multiple subunits (e.g. IL-12) that require expression of the independent subunits at equimolar amounts.

L'invention porte sur des matériaux et procédés relatifs à l'expression de gènes et en particulier sur l'expression de plusieurs produits géniques en un cistron unique. Cela s'obtient par la construction d'un produit d'assemblage comportant une première séquence codant pour un premier polypeptide (par exemple une sous-unité de protéine), puis d'un deuxième produit d'assemblage comportant une deuxième séquence codant pour un deuxième polypeptide (par exemple une autre sous-unité de protéine), la première sous-unités étant séparée de la deuxième par une séquence de liaison codant pour un site de coupure d'endoprotéase. Une fois exprimée en tant que protéine unique de fusion, elle peut être coupée et ramenée à ses éléments constitutifs c'est-à-dire ses premiers et deuxièmes polypeptides biologiquement actifs. L'invention touche en particulier l'expression des protéines comportant de multiples sous-unités (par exemple l'IL-12) requérant l'expression de sous-unités indépendantes en quantité équimolaire.

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