Hematopoietic stem cells and methods of treatment of...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/10 (2006.01) C12N 5/0797 (2010.01) A61P 27/02 (2006.01) A61K 35/28 (2006.01) C12N 9/00 (2006.01)

Patent

CA 2526670

Isolated, mammalian, adult bone marrow-derived, lineage negative hematopoietic stem cell populations (Lin-HSCs) contain endothelial progenitor cells (EPCs) capable of rescuing retinal blood vessels and neuronal networks in the eye. Preferably at least about 20% of the cells in the isolated Lin-HSCs express the cell surface antigen CD31. The isolated Lin-HSC populations are useful for treatment of ocular vascular diseases. In a preferred embodiment, the Lin-HSCs are isolated by extracting bone marrow from an adult mammal; separating or plurality of monocytes from the bone marrow; labeling the monocytes with biotin-conjugated lineage panel antibodies to one or more lineage surface antigens; removing of monocytes that are positive for the lineage surface antigens from the plurality of monocytes, and recovering a Lin--HSC population containing EPCs. Isolated Lin-HSCs that have been transfected with therapeutically useful genes are also provided, and are useful for delivering genes to the eye for cell-based gene therapy. Methods of preparing isolated stem cell populations of the invention, and methods of treating ocular diseases and injury are also described.

L'invention porte sur des populations de cellules souches hématopoïétiques de mammifère, isolées, provenant de la moelle osseuse d'un adulte et constituées de cellules engagées vers une lignée (Lin-HSC) qui contiennent des cellules progénitrices endothéliales (CPE) capables de favoriser une revascularisation de la rétine et une régénérescence des réseaux neuronaux de l'oil. De préférence, au moins environ 20 % des cellules des Lin-HSC isolées expriment l'antigène de surface CD31. Les populations de Lin-HSC isolées sont utiles dans le traitement de maladies vasculaires des yeux. Dans un mode de réalisation privilégié, les cellules Lin-HSC ont été isolées de la manière suivante : extraction de la moelle osseuse d'un mammifère adulte, séparation ou population enrichie de monocytes provenant de la moelle osseuse, marquage des monocytes avec un panel d'anticorps conjugués à la biotine dirigés contre une ou plusieurs antigènes de surface définissant la lignée, élimination des monocytes exprimant les antigènes de surface de la lignée de la population enrichie de monocytes et récupération d'une population de Lin-HSC contenant des CPE. L'invention porte aussi sur des Lin-HSC isolées ayant été transfectées avec gènes ayant une utilité thérapeutique. Ces cellules sont utiles en thérapie génique cellulaire pour faire pénétrer les gènes dans l'oil. Des méthodes de préparation des populations de cellules souches isolées de l'invention et des traitements destinés aux maladies et aux lésions occulaires sont aussi décrits.

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