Hemoglobin with chemically introduced disulfide cross-links...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – C

Patent

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Details

C07C 321/12 (2006.01) C07C 323/59 (2006.01) C07F 9/09 (2006.01) C07K 14/805 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2308277

Hemoglobin cross-linked with disulfide linkages at sites external to the native globin chains is prepared by reacting hemoglobin with site-directed reagents exemplified by N,N'-bis Cbz-cysteinyl bis (methyl phosphate). Reaction with deoxy hemoglobin produces two main products: cross-linked hemoglobin as the bis cysteinyl amide of the .epsilon.-amino group of the side chain of Lys-82 of the two .beta. subunits, and modified but non-cross-linked hemoglobin that has each of the same amino groups modified as the cysteinyl amide. Disulfide cross-linked hemoglobin has a variety of uses. The disulfide bonds can be cleaved with reducing agents to give terminal sulfhydryl groups, useful in chemical bonding to sulfhydryl group-containing biochemically active compounds to form conjugates thereof for drug delivery. Hemoglobin cross- linked through disulfide bonds can be formed from the sulfhydryl group terminated reduction products, for use as a hemoglobin-based oxygen carrier.

L'invention concerne l'hémoglobine réticulée chimiquement avec des liaisons disulfures à des sites extérieurs aux chaînes de globines natives, qui est préparée par réaction de l'hémoglobine avec des réactifs dirigés, comme N.N'-bis Cbz-cystéinyl bis (méthylphosphate). La réaction avec la désoxyhémoglobine donne deux principaux produits: l'hémoglobine réticulée en tant que le bis cystéinyl amide du groupe .epsilon.-amino de la chaîne latérale de Lys-82 des deux sous-unités .beta., et l'hémoglobine modifiée mais non réticulée possédant chacun des mêmes groupes amino modifiés du cystéinyl bis amide. L'hémoglobine réticulée avec des liaisons disulfures présente de nombreuses possibilités d'utilisation. Les liaisons disulfures peuvent être clivées avec des agents réducteurs pour donner des groupes sulfhydrylés capables de liaisons chimiques efficaces avec des composés biochimiquement actifs contenant des groupes sulfhydrylés pour former des conjugués desdits groupes sulfhydrylés destinés à l'administration de médicaments. L'hémoglobine réticulée avec des liaisons disulfures peut être formée à partir de produits terminés par réduction du groupe sulfhydrylé et utilisée comme transporteur d'oxygène à base d'hémoglobine.

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