C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/38 (2006.01) A61K 39/245 (2006.01) A61P 31/04 (2006.01) C07K 14/035 (2006.01) C07K 16/08 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)
Patent
CA 2199408
The present invention provides variant HSV-1 glycoprotein D and HSV-2 glycoprotein D molecules capable of preventing infection of cells by herpes simplex virus types 1 and/or 2. Also provided are novel purified and isolated polynucleotides encoding the variant gD molecules. HSV gD-1 and gD-2 region IV variants or fragments thereof are specifically contemplated by the invention. The presently preferred variant molecule gD-1(.DELTA.290-299t) is the product of recombinant expression in Sf9 cells of a fusion protein including the signal peptide of honeybee melittin and Patton strain HSV-1 gD wherein (1) the Patton strain amino acid residues 290 through 299 of the mature gD-1 protein have been replaced with the amino acid residues arginine, lysine, isoleucine and phenylalanine, and (2) Patton strain amino acid residues 308 through 369 have been replaced with five histidine residues. When expressed in Sf9 cells, cleavage of the melittin signal peptide results in the presence of aspartate and proline residues at the amino terminus of the variant molecule. The amino acid sequence of gD-1(.DELTA.290-299t) is set out in SEQ ID NO: 2 and the preferred DNA sequence encoding gD-1(.DELTA.290-299t) is set out in SEQ ID NO: 1. Administration of gD variant molecules of the invention to mammalian subjects, especially humans, for the purpose of preventing HSV infection and/or ameliorating pathological sequelae of HSV infection is specifically contemplated.
Cette invention concerne des molécules de glycoprotéine D VHS-1 et de glycoprotéine D VHS-2 variantes capables d'empêcher l'infection des cellules par les types 1 et/ou 2 du virus de l'herpès simplex. On présente également de nouveaux polynucléotides purifiés et isolés codant les molécules gD variantes, cette invention concernant plus spécifiquement les variants de la région IV de gD-2 et gD-1 du VHS ou des fragments de ces derniers. La molécule gD-1 ( DELTA 290-299t) variante actuellement préférée est le produit de l'expression par recombinaison dans les cellules Sf9 d'une protéine de fusion comprenant le peptide signal de melittine d'abeille et de gD VHS-1 de souche Patton dans lequel (1) les restes d'acides aminés de souche Patton 290 à 299 de la protéine gD-1 mature ont été remplacés par les restes d'acides aminés arginine, lysine, isolencine et phénylalanine, et (2) les restes d'acides aminés 308 à 369 ont été remplacés par cinq restes d'histidine. Lorsque la molécule est exprimée dans les cellules Sf9 il résulte du clivage du peptide signal de mellitine des restes d'aspartate et de proline à la terminaison amino de la molécule variante. La séquence d'acides aminés de gD-1 ( DELTA 290-299t) est incorporée dans la SEQ ID NO: 2 et la séquence d'ADN préférée codant gD-1 ( DELTA 290-299t) est incorporée dans la SEQ ID NO: 1. Cette invention concerne spécifiquement l'administration de molécules variantes gD à des mammifères, plus particulièrement à des patients humains, afin d'empêcher l'infection par le VHS et/ou d'améliorer les séquelles pathologiques de l'infection par le VHS.
Cohen Gary H.
Eisenberg Roselyn J.
Nicola Anthony
Competitive Technologies Inc.
Smart & Biggar
LandOfFree
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