C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/86 (2006.01) A61K 35/76 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/035 (2006.01) C07K 16/18 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)
Patent
CA 2286859
The ICP4 protein of herpes simplex virus plays an important role in the transactivation of viral genes. The present invention discloses that ICP4 also has the ability to inhibit apoptosis. This function appears to reside in functional domain distinct from the transactivating function, as indicated by studies using temperature sensitive mutants of ICP4 that have transactivating function at elevated temperatures. Also disclosed are methods for inhibition of apoptosis using ICP4 or an ICP4 encoding gene, such as an .alpha.4 gene, methods for inhibiting ICP4's apoptosis-inhibiting function, and methods for the production of recombinant proteins and treatment of HSV infections. Further, the present invention discloses that the HSV-1 mutant lacking the .alpha.4 gene, has a secondary mutation in the gene US3 specifying a protein kinase. Thus a functional US3, a viral gene encoding a protein kinase known to phosphorylate serine/threonine within a specific arginine rich consensus sequence, is required in order to block apoptosis. Also disclosed are methods for inhibition of apoptosis using US3 or an US3 encoding gene, methods for inhibiting US3's apoptosis-inhibiting function, and methods for the production of recombinant proteins and treatment of HSV infections.
La protéine ICP4 du virus de l'herpès simplex joue un rôle important dans la transactivation de gènes viraux. La présente invention révèle que l'ICP4 a également la capacité d'inhiber l'apoptose. Il semble que cette fonction réside dans un domaine fonctionnel distinct de la fonction de transactivation, comme l'indiquent des études utilisant des mutants d'ICP4 sensibles à la température qui possèdent une fonction de transactivation à des températures élevées. La présente invention concerne également des méthodes permettant d'inhiber l'apoptose à l'aide d'ICP4 ou d'un gène codant ICP4, tel que le gène .alpha.4, des méthodes d'inhibition de la fonction d'inhibition de l'apoptose induite par ICP4 et des méthodes de production de protéines de recombinaison et de traitement d'infections dues au virus de l'herpès simplex (HSV). La présente invention révèle en outre que le mutant de HSV-1 auquel il manque le gène .alpha.4 possède une mutation secondaire dans le gène U¿S?3 spécifiant une protéine kinase. Ainsi, un U¿S?3 fonctionnel, un gène viral codant une protéine kinase connue pour phosphoryler la sérine/thréonine dans une séquence consensus spécifique riche en arginine, est requis pour bloquer l'apoptose. Des méthodes d'inhibition de l'apoptose à l'aide de U¿S?3 ou d'un gène codant U¿S?3, des méthodes d'inhibition de la fonction d'inhibition de l'apoptose induite par U¿S?3, et des méthodes de production de protéines de recombinaison et de traitement d'infections dues à HSV sont encore décrites.
Leopardi Rosario
Roizman Bernard
Arch Development Corporation
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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