Heterologous biomass degrading enzyme expression in...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/56 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 9/22 (2006.01) C12N 9/24 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01) C12P 7/10 (2006.01) C12P 19/02 (2006.01) C12P 19/14 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01)

Patent

CA 2748135

Thermophilic gram-positive anaerobic host cells, for example Themoanaerobacterium sachharolyticum ("T sacch"), express heterologous biomass degrading enzymes, such as cellulases, and are able to produce useful fermentation prod-ucts from cellulose. Useful fermentation products include, for example, ethanol, acetic acid, lactic acid or CO2. In order to pro-vide maximum expression and activity levels, biomass degrading enzymes can be expressed from codon-optimized nucleotide se-quences, can be expressed under the control of a high-efficiency promoter, and/or can be fused to a signal peptide. In addition, the host cell, for example, a T sacch host cell, can be genetically altered to further improve ethanol production, for example by dis-rupting the production of organic products other than ethanol.

La présente invention concerne des cellules hôtes anaérobies Gram-positives thermophiles. Les cellules hôtes anaérobies Gram-positives thermophiles selon l'invention, par exemple Themoanaerobacterium sachharolyticum (« T. sacch »), expriment des enzymes de dégradation de biomasse hétérologues, par exemple des cellulases, et peuvent produire des produits de fermentation utiles à partir de la cellulose. Les produits de fermentation utiles incluent par exemple l'éthanol, l'acide acétique, l'acide lactique ou CO2. Pour obtenir des niveaux d'expression et d'activités maximaux, les enzymes de dégradation de biomasse peuvent être exprimées à partir de séquences nucléotidiques à codons optimisés, sous le contrôle d'un promoteur de forte efficacité, et/ou peuvent être fusionnées à un peptide de signal. De plus, la cellule hôte, par exemple une cellule hôte de T. sacch, peut être génétiquement modifiée pour améliorer plus avant la production d'éthanol, par exemple en perturbant la production de produits organiques différents de l'éthanol.

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