High throughput screening for novel enzymes

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/25 (2006.01) C40B 30/00 (2006.01)

Patent

CA 2294380

Disclosed is a process for identifying clones having a specified activity of interest, which process comprises (i) generating one or more expression libraries derived from nucleic acid directly isolated from the environment; and (ii) screening said libraries utilizing a fluorescence activated cell sorter to identify said clones. More particularly, this is a process for identifying clones having a specified activity of interest by (i) generating one or more expression libraries derived from nucleic acid directly or indirectly isolated from the environment; (ii) exposing said libraries to a particular substrate or substrates of interest; and (iii) screening said exposed libraries utilizing a fluorescence activated cell sorter to identify clones which react with the substrate or substrates. Also provided is a process for identifying clones having a specified activity of interest by (i) generating one or more expression libraries derived from nucleic acid directly or indirectly isolated from the environment; and (ii) screening said exposed libraries utilizing an assay requiring co-encapsulation, a binding event or the covalent modification of a target, and a fluorescence activated cell sorter to identify positive clones.

Cette invention concerne un procédé permettant d'identifier des clones ayant une activité spécifique recherchée. Ce procédé consiste (i) à générer une ou plusieurs banques d'expression dérivées d'acide nucléique isolé directement de l'environnement; et (ii) à cribler ces banques à l'aide d'un trieur de cellules activées par fluorescence pour identifier lesdits clones. On décrit plus particulièrement un procédé permettant d'identifier des clones ayant une activité spécifique recherchée, et consistant (i) à générer une ou plusieurs banques d'expression dérivées d'acide nucléique isolé directement ou indirectement de l'environnement; (ii) à exposer lesdites banques à un substrat ou à plusieurs substrats d'intérêt; (iii) à cribler lesdites banques exposées à l'aide d'un trieur de cellules activées par fluorescence pour identifier les clones qui réagissent avec le ou les substrats. On décrit également un procédé permettant d'identifier des clones ayant une activité spécifique recherchée, et consistant (i) à générer une ou plusieurs banques d'expression dérivées d'acide nucléique isolé directement ou indirectement de l'environnement; et (ii) à cribler lesdites banques exposées à l'aide d'un dosage nécessitant la co-encapsulation, d'un élément de liaison ou la modification covalente d'une cible, et d'un trieur de cellules activées par fluorescence pour identifier les clones positifs.

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