Homogeneous tests for sequentially determining lipoprotein...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/92 (2006.01) C12Q 1/60 (2006.01)

Patent

CA 2375210

The invention provides new homogeneous assays for the determination of the amount of LDL-C, of HDL-C, and of total cholesterol present in a sample. The method comprises complexing a first lipoprotein fraction with a complex- forming agent, such as an antibody, using enzymes to detect cholesterol in the non-complexed lipoprotein fraction, measuring the amount of cholesterol in the non-complexed fraction to provide a first cholesterol value, and then dissociating the complexed lipoprotein fraction from the complex-forming agent so that that cholesterol is available to be a substrate for the enzymes. The total amount of cholesterol present in the sample can then be determined. Further, the first cholesterol value obtained can be subtracted from the total cholesterol to obtain a value for the first lipoprotein fraction present in the sample. Optionally, a triglyceride assay can then also be performed on the sample in the same tube.

La présente invention concerne des nouvelles analyses homogènes permettant de déterminer la quantité de cholestérol à lipoprotéines de basse densité (LDL-C) et de cholestérol à lipoprotéines de haute densité (HDL-C), ainsi que la quantité totale de cholestérol dans un échantillon. Le procédé consiste : à former un complexe composé d'une première fraction de lipoprotéine et d'un agent complexant, tel qu'un anticorps, à l'aide d'enzymes afin de détecter le cholestérol dans la fraction de lipoprotéine non complexée ; à mesurer la quantité de cholestérol dans la fraction de lipoprotéine non complexée de manière à fournir une première valeur de cholestérol ; puis, à séparer la fraction de lipoprotéine complexée du complexant de sorte que le cholestérol soit disponible pour servir de substrat aux enzymes. La quantité totale de cholestérol présent dans l'échantillon peut ainsi être déterminée. En outre, la première valeur de cholestérol obtenue peut être soustraite de la quantité totale de cholestérol de manière à obtenir une valeur pour la première fraction de lipoprotéine présente dans l'échantillon. Eventuellement, une analyse de la triglycéride peut également être effectuée sur l'échantillon contenu dans le tube.

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