Host cells and methods of use

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 1/19 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/81 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2753584

The present invention provides genetically modified Pichia strains wherein at least one nucleic acid sequence encoding a functional gene product and/or at least one nucleic acid sequence necessary for expression of at least one functional gene product in said Pichia strain is genetically modified, wherein said gene product is responsible for proteolysis and/or glycosylation in said genetically modified Pichia strain. In particular, Pichia strains are provided wherein nucleic acid sequence encoding a functional gene product or expression of said gene product are genetically modified: PEP 4, PRB1, YPS1, YPS2, YMP1, YMP2, YMP 3 and PMT4. Also provided herein are genetically modified host cells wherein wild type parent of said genetically modified host cell comprises a gene encoding a polypeptide having at least 60% sequence identity to amino acids 1-865 of SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:6 and SEQ ID NO: 8 wherein said gene is genetically modified in the genome of said host cell such that the gene product is reduced or eliminated in said genetically modified host cell compared with said wild type host cell.

La présente invention porte sur des souches de Pichia génétiquement modifiées, dans lesquelles au moins une séquence d'acides aminés codant pour un produit de gène fonctionnel et/ou au moins une séquence d'acide nucléique nécessaire pour l'expression d'au moins un produit de gène fonctionnel dans ladite souche de Pichia est génétiquement modifiée, ledit produit de gène étant responsable d'une protéolyse et/ou glycosylation dans ladite souche Pichia génétiquement modifiée. En particulier, l'invention porte sur des souches de Pichia dans lesquelles une séquence d'acide nucléique codant pour un produit de gène fonctionnel ou l'expression dudit produit de gène sont génétiquement modifiées : PEP 4, PRBl, YPSl, YPS2, YMPl, YMP2, YMP 3 et PMT4. L'invention porte également sur des cellules hôtes génétiquement modifiées dans lesquelles un parent de type sauvage de ladite cellule hôte génétiquement modifiée comprend un gène codant pour un polypeptide présentant au moins 60 % d'identité de séquence avec les acides aminés 1-865 de SEQ ID NO :4, SEQ ID NO :6 et SEQ ID NO : 8, ledit gène étant génétiquement modifié dans le génome de ladite cellule hôte, de telle sorte que le produit de gène est réduit ou éliminé dans ladite cellule hôte génétiquement modifiée par comparaison avec ladite cellule hôte de type sauvage.

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