Human liver progenitors

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/071 (2010.01) C12N 5/0735 (2010.01) C12N 5/074 (2010.01) A01N 1/02 (2006.01) A61K 35/407 (2006.01) A61P 1/16 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2360730

Methods of isolating and cryopreserving progenitors from human liver are disclosed which include processing human liver tissue to provide a substantially single cell suspension comprising progenitors and non- progenitors of one or more cell lineages found in human liver; subjecting the suspension to a debulking step, which reduces substantially the mumber of non- progenitors in the suspension, and which provides a debulked suspension enriched in progenitors exhibiting one or more markers associated with at least one of the one or more cell lineages; and selecting from said debulked suspension those cells, which themselves, their progeny, or more mature forms thereof expess one or more markers associated with at least one of the one or more cell lineages. Among these markers are CD14, CD34, CD38, CD45, and ICAM. Hepatic progenitors are characterized as being 6-15 µ in diameter, diploid, glycophorin A-, CD45-, AFP+++, ALB+, ICAM+ and with subpopulations varying in expression of CD 14+, CD34++, CD38++, CD117+. These progenitor subpopulations have characteristics expected for cells that are particularly useful in liver cell and gene therapies and for extablishing bioartificial organs.

L'invention concerne des procédés d'isolement et de cryopréservation de progéniteurs de foie humain consistant à traiter les tissus de foie humain afin d'obtenir une suspension de cellules sensiblement isolées contenant des progéniteurs et des non progéniteurs d'au moins une lignée cellulaire de foie humain ; à soumettre ladite suspension à une étape de réduction de volume qui réduit considérablement le nombre de non-progéniteurs dans la suspension et qui aboutit à une suspension réduite riche en progéniteurs présentant au moins un marqueur associé à au moins une des lignées cellulaires ; et à sélectionner dans la dite suspension ces cellules, leur descendance ou leur formes plus mûres exprimant au moins un marqueur associé à au moins une des lignées cellulaires. Parmi ces marqueurs figurent CD14, CD34, CD38, CD45, et ICAM. Les progéniteurs hépatiques sont caractérisés par le fait qu'elles ont un diamètre de 6-15 µ et qu'elles sont diploïdes, glycophorine A?-¿, CD45?-¿, AFP?+++¿, ALB?+¿, ICAM?+¿, avec des sous-populations dont l'expression de CD 14?+¿, CD34?++¿, CD38?++¿, CD117?+¿ varie. Ces populations de progéniteurs possèdent les caractéristiques attendues pour des cellules particulièrement utiles aux thérapies géniques et cellulaires hépatiques, ainsi qu'à la réalisation d'organes bio-artificiels.

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