Hybrid human/animal factor viii

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/12 (2006.01) A61K 38/37 (2006.01) C07K 14/755 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2185327

A hybrid procoagulant factor VIII is produced by isolation and recombination of human and other non-human mammalian factor VIII subunits or domains, or by genetic engineering of the human and animal factor VIII genes. Subunits or domains of factor VIII that have been purified from human or animal plasma are isolated, and hybrid human/animal factor VIII is produced by (1) mixing either animal heavy chain subunits with human light chain subunits or by mixing human heavy chain subunits with animal light chain subunits, thereby producing human light chain/animal heavy chain and human heavy chain/animal light chain hybrid molecules; or by (2) mixing one or more domains of one species with one or more domains of the other species. These hybrid molecules are isolated by ion exchange chromatography. Alternatively, recombinant DNA methods are used to change elements of animal factor VIII or human factor VIII to the corresponding elements of human factor VIII or animal factor VIII, respectively, to produce hybrid human/animal factor VIII.

On produit un facteur VIII procoagulant hybride en isolant et en recombinant des sous-unités ou domaines du facteur VIII mammalien humain ou non, ou par manipulation génétique des gènes du facteur VIII humain et animal. Des sous-unités ou domaines du facteur VIII purifiés à partir de plasma humain ou animal sont isolés, le facteur VIII hybride animal/humain étant produit: (1) par mélange de sous-unités de chaîne lourde animale avec des sous-unités de chaîne légère humaine, ou par mélange de sous-unités de chaîne lourde humaine avec des sous-unités de chaîne légère animale, de manière à produire des molécules hybrides de chaîne légère humaine/chaîne lourde animale et de chaîne lourde humaine/chaîne légère animale; ou (2) par mélange d'un ou plusieurs domaines d'une espèce avec un ou plusieurs domaines de l'autre espèce. Ces molécules hybrides sont isolées par chromatographie d'échange ionique. On peut également utiliser des procédés par ADN de recombinaison pour modifier respectivement des éléments du facteur VIII animal ou humain en éléments correspondants du facteur VIII humain ou animal, afin de produire le facteur VIII hybride humain/animal.

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