Identification of genes altered in multiple myeloma

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/12 (2006.01) A61K 31/70 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/82 (2006.01) C07K 16/32 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2256455

This invention provides a method of determining a chromosomal breakpoint in a subject suffering from multiple myeloma which comprises steps of: (a) obtaining a DNA sample from the subject suffering from multiple myeloma; (b) determining whether there is J and C disjunction in the immunoglobulin heavy chain gene in the obtained DNA sample; (c) obtaining a genomic library having clones which contain genomic DNA fragments from the DNA sample which shows positive J and C disjunction; (d) selecting and isolating clones of the obtained library which show positive hybridization with a probe which is capable of specifically hybridizing with the C but not the J region of the immunoglobulin heavy chain gene; (e) preparing fluorescent probes from the genomic DNA fragments of the isolated clones from step (d); (f) hybridizing said fluorescent probes with metaphase chromosomes; and (g) determining the identity of the chromosomes which are capable of hybridizing to said fluorescent probes, wherein the identification of a chromosome other than chromosome 14 would indicate that the chromosomal breakpoint is between chromosome 14 and the identified chromosome, thereby determining a chromosomal breakpoint in a subject suffering from multiple myeloma. This invention also provides the identified gene altered by a chromosomal breakpoint and various uses thereof.

Cette invention concerne un procédé permettant d'établir le point de cassure chromosomique chez un sujet atteint de myélome multiple. Ledit procédé consiste (a) à prélever un échantillon d'ADN chez un sujet atteint de myélome multiple, (b) à déterminer s'il existe une disjonction J et C dans le gène des chaînes lourdes des immunoglobulines dudit échantillon, (c) à produire une banque génomique ayant des clones contenant des fragments d'ADN génomiques issus de l'échantillon d'ADN qui présente une disjonction J et C positive, (d) à sélectionner et à isoler des clones de ladite banque qui présentent une hybridation moléculaire positive au moyen d'une sonde capable de s'hybrider avec la région C et non avec la région J du gène des chaînes lourdes d'immunoglobulines, (e) à préparer des sondes fluorescentes à partir des fragments d'ADN génomiques des clones isolés au cours de l'étape (d), (f) à hybrider lesdites sondes fluorescentes à des chromosomes en métaphase, et (g) à établir l'identité des chromosomes qui sont capables de s'hybrider auxdites sondes fluorescentes, l'identification d'un chromosome autre qu'un chromosome 14 indiquant que le point de cassure chromosomique est compris entre le chromosome 14 et le chromosome identifié, ce qui permet d'établir le point de cassure chromosomique chez le sujet atteint de myélome multiple. Cette invention a également trait au gène identifié modifié par un point de cassure chromosomique ainsi qu'à diverses utilisations de ce gène.

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