G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 15/14 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) G01N 21/84 (2006.01) G01N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2289930
Detection of fetal nucleated red blood cells (NR-BCs) is achieved by employing a combination of bright-field and fluorescence images of nuclear and cytoplas-mic markers. The brightfield and fluorescence images are all obtained with a single multi-bandpass dichroic mirror. The objects in the sample are stained with a fluorescent dye that selectively stains nuclei and a dye that selectively stains fetal hemoglubin in the cytoplasm of fetal RBCs. UV excitation provides fluorescent emissions from the stained cell nuclei and visible illumi-nation provides brightfield transmission of light that is absorbed by the stained cytoplasm. The images are processed to determine regions where the fluorescent emissions by cell nuclei in response to the UV exci-tation and the absorption by fetal hemoglobin of the brightfield illumination overlap or are in close proximity. The brightfield and fluorescence images may be sequentially acquired or derived from a single image where the UV excitation and visible illumination occur simultaneously.
Pour détecter des globules rouges nucléés de foetus (NRBC), on utilise une combinaison d'images à fond clair et d'images à fluorescentes et de marqueurs nucléaires et cytoplasmiques. Les images à fond clair et les images fluorescentes sont toutes obtenues à l'aide d'un miroir dichroïque unique à plusieurs bandes passantes. Les objets de l'échantillon sont colorés avec un colorant fluorescent qui colore sélectivement les noyaux et avec un colorant qui colore sélectivement l'hémoglobine du foetus dans le cytoplasme des globules rouges du foetus. L'excitation par les rayons ultraviolets produit des émissions fluorescentes émanant des noyaux cellulaires colorés alors que l'éclairage avec de la lumière visible assure la transmission à fond clair de la lumière qui est absorbée par le cytoplasme coloré. Les images sont traitées pour déterminer des régions dans lesquelles les émissions fluorescentes émanant des noyaux cellulaires, en réponse à l'excitation des rayons ultraviolets et l'absorption par l'hémoglobine foetal de l'éclairage sur fond clair se chevauchent ou sont en voisinage proche. Les images à fond clair et les images fluorescentes peuvent être acquises de manière séquentielle ou peuvent provenir d'une seule et unique image dans laquelle l'excitation par les rayons ultraviolets et l'éclairage avec de la lumière visible se produisent simultanément.
Applied Imaging Corporation
Genetix Corp.
Sim & Mcburney
LandOfFree
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