C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2658028
The present invention comprises a method method to identify tumor suppressor genes by detecting genes in a mouse retroviral insertion mutagenesis model which expression is inhibited by methylation of the viral insertion or the VIS-flanking gene. This is preferably accomplished by first randomly cutting the mouse genomic DNA, immunoprecipitating the methylated DNA and amplifying the VIS-flanking DNA by inverse PCR, optionally followed by cloning and sequencing of the amplicons. Next to the already known tumor suppressor genes Smad1 and Mad1-like, several putative tumor suppressor genes have been found. The tumor suppressing properties of these genes, as indicated in Table 3 also form part of the present invention. Further use of these genes and/or its substrates or downstream products, for diagnosis and therapy of cancer, preferably AML is envisaged.
La présente invention comprend un procédé pour identifier des gènes suppresseurs tumoraux en détectant des gènes dans un modèle de mutagenèse par insertion rétrovirale chez la souris, dont on limite l'expression par méthylation de l'insertion virale ou du gène flanquant le site d'intégration du virus. De préférence, ceci est accompli premièrement en découpant de façon aléatoire l'ADN génomique de la souris, en réalisant l'immunoprécipitation de l'ADN méthylé et en amplifiant l'ADN flanquant le site d'intégration du virus par PCR inverse, procédé éventuellement suivi du clonage et du séquençage des amplicons. En plus des gènes suppresseurs de tumeurs déjà connus, similaires aux Smad1 et Mad1, on a découvert plusieurs gènes suppresseurs de tumeurs putatifs. Les propriétés de suppression tumorale de ces gènes, comme indiqué dans le tableau 3, font également partie de la présente invention. On envisage une utilisation supplémentaire de ces gènes et/ou de leurs substrats ou produits en aval, pour le diagnostic et le traitement du cancer, et de préférence de la leucémie myéloïde aiguë.
Beekman Renee
Erkeland Stefanus Joseph
Touw Ivo Paul
Erasmus University Medical Center Rotterdam
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1748617