Immobilization of oligonucleotides and proteins in...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/00 (2006.01) C07H 1/00 (2006.01) C07H 15/00 (2006.01) C08J 3/00 (2006.01) C12M 1/34 (2006.01) C12N 11/00 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2533924

The use of sugar-containing hydrogels as very highly porous, aqueous support material for the immobilization of oligonucleotides, peptides, proteins, antigens, antibodies, polysaccharides, and other biomolecules for sensor applications. The unusually large sizes of the interconnected pores allow large target molecules to pass rapidly into and through the gel and bind to immobilized biomolecules. An additional advantage of the sugar-containing hydrogels are their extremely low non-specific absorption of labeled target molecules, providing low background levels. State-of-the-art hydrogel materials do not have this type of homogeneous interconnected macroporosity, thus large target molecules cannot readily diffuse through them. Additionally, they nearly always experience non-specific absorption of labeled target molecules, limiting their usefulness in sensor applications. This invention provides a method for preparing sugar polyacrylate hydrogels with functional chemical groups which covalently bond oligonucleotides and peptides. A method for copolymerizing acrylate- terminated oligonucleotides with sugar acrylate monomers and diacrylate cross-linking agents is also provided.

L'invention concerne l'utilisation d'hydrogels contenant du sucre comme substrat aqueux hautement poreux pour l'immobilisation d'oligonucléotides, de peptides, de protéines, d'antigènes, d'anticorps, de polysaccharides et de biomolécules, pour des applications de détection. Les dimensions exceptionnellement grandes des pores interconnectés permettent à de grosses molécules cibles de passer rapidement dans le gel et à travers le gel et de se fixer à des biomolécules immobilisées. Ces hydrogels contenant du sucre se caractérisent également par leur capacité d'absorption non spécifique extrêmement faible de molécules cibles marquées, fournissant des niveaux de fond bas. Les hydrogels utilisés actuellement ne possèdent pas ce type de macroporosités interconnectées homogènes, ce qui signifie que les grosses molécules cibles ne peuvent pas diffuser rapidement à travers ces hydrogels. Par ailleurs, il se produit quasiment toujours une absorption non spécifique de molécules cibles marquées, ce qui limite l'usage des hydrogels dans des applications de détection. La présente invention concerne également un procédé destiné à la préparation d'hydrogels de polyacrylate à base de sucre comprenant des groupes chimiques fonctionnels qui se lient par covalence à des oligonucléotides et à des peptides. L'invention concerne également un procédé destiné à la copolymérisation d'oligonucléotides à terminaison acrylate- avec des monomères d'acrylate à base de sucre et des agents de réticulation de diacrylate.

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