Improved aav vectors produced in insect cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/864 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/35 (2006.01) C12N 15/866 (2006.01)

Patent

CA 2622233

The present invention relates to the production of adeno-associated viral vectors in insect cells. The insect cells therefore comprise a first nucleotide sequence encoding the adeno-associated virus (AAV) capsid proteins, whereby the initiation codon for translation of the AAV VP1 capsid protein is a non-ATG, suboptimal initiation codon. The insect cell further comprises a second nucleotide sequence comprising at least one AAV inverted terminal repeat (ITR) nucleotide sequence; a third nucleotide sequence comprising a Rep52 or a Rep40 coding sequence operably linked to expression control sequences for expression in an insect cell; and, a fourth nucleotide sequence comprising a Rep78 or a Rep68 coding sequence operably linked to expression control sequences for expression in an insect cell. The invention further relates to adeno-associated viral vectors with an altered ratio of the viral capsid proteins that provides improved infectivity o f the viral particles.

La présente invention concerne la production de vecteurs viraux associés à l'adéno-virus dans des cellules d'insecte. Ainsi, ces cellules comprennent une première séquence nucléotidique codant pour des protéines de capside de virus associés à l'adéno-virus (AAV). Le codon initiateur de translation pour la protéine à capside AAV VP1 est un codon initiateur sub-optimal non ATG. La cellule d'insecte comprend une seconde séquence nucléotidique incluant au moins une séquence nucléotidique terminal inversée-répétée (ITR) AVV; une troisième séquence nucléotidique incluant une séquence de codage Rep52 ou Rep40 reliée fonctionnel à des séquences de commande d'expression pour l'expression dans une cellule d'insecte ; et une quatrième séquence nucléotidique incluant une séquence de codage Rep78 ou a Rep68 reliée fonctionnel à une séquence de commande d'expression pour l'expression dans une cellule d'insecte. De plus, cette invention concerne des vecteurs viraux associés à l'adéno-virus avec un rapport modifié des protéines à capside virales qui assurent une infectivité améliorée des particules virales.

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