Improved alphavirus replicons and helper constructs

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/86 (2006.01) A61K 35/76 (2006.01) C07K 14/18 (2006.01)

Patent

CA 2518546

The present invention provides a recombinant nucleic acid comprising: a first nucleic acid sequence encoding a 5' alphavirus replication recognition sequence; at least one second nucleic acid sequence encoding an alphavirus nonstructural protein; at least one alphavirus subgenomic promoter; at least one IRES element; at least one heterologous nucleic acid; and a third nucleic acid encoding a 3' alphavirus replication recognition sequence. Further provided are methods of making alphavirus particles comprising a recombinant nucleic acid of this invention and methods of using the compositions of this invention. Also provided is a recombinant helper nucleic acid comprising: a first nucleic acid sequence encoding a 5' alphavirus replication recognition sequence; an alphavirus subgenomic promoter; an IRES element; a second nucleic acid encoding an alphavirus structural protein; and a third nucleic acid encoding a 3' alphavirus replication recognition sequence.

La présente invention porte sur un acide nucléique recombinant comprenant: une première séquence d'acide nucléique codant une séquence de reconnaissance de réplication de l'alphavirus en 5'; au moins une deuxième séquence d'acide nucléique codant une protéine non structurale de l'alphavirus; au moins un promoteur sous-génomique de l'alphavirus; au moins un élément IRES; au moins un acide nucléique hétérologue et une troisième séquence d'acide nucléique codant une séquence de reconnaissance de réplication de l'alphavirus en 3'. L'invention porte également sur des procédés de fabrication de particules de l'alphavirus comprenant un acide nucléique recombinant de cette invention, et sur des procédés d'utilisation des compositions de cette invention. L'invention porte encore sur un acide nucléique auxiliaire recombinant comprenant: une première séquence d'acide nucléique codant une séquence de reconnaissance de réplication de l'alphavirus; un promoteur sous-génomique de l'alphavirus; un élément IRES; une deuxième séquence d'acide nucléique codant une protéine structurale de l'alphavirus; et une troisième séquence d'acide nucléique codant une séquence de reconnaissance de réplication de l'alphavirus en 3'.

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