C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/08 (2006.01)
Patent
CA 2569242
The present invention provides a method of enhancing the efficiency of differentiation of hES cells into cardiomyocytes which method comprises incubating the cells under serem free conditions. The method typically includes providing cells that induce cardiomyocyte differentiation by cell to cell contact. Differentiation to cardiomyocytes can occur via two routes, namely by spontaneous differentiation and by induced differentiation. Without wishing to be bound by theory, the present inventors hypthesise that, in the case of induced differentiation, END-2 cells, for instance, are needed for aggregation to cause local high cell densities and in inducing differentation of nascent mesodern. This second step could be enhanced in any human embryonic stem cell line leading to the prediction that it will work in lines other than hES. In cell lines that undergo sponantaneous differentiation, it is hypothesised that local induction of embryoid bodies in edoderm occurs. Typically for induced differentiation this method will also comprise culturing the hES cell with a cell excreting at least one cardiomyocyte differentiation inducing factor or with an extracellular medium therefrom, under conditions that induce differentiation.
L'invention concerne un procédé permettant d'améliorer le rendement de la différenciation des cellules hES en cardiomyocytes. Ce procédé consiste à incuber les cellules dans des conditions exemptes de sérum. Le procédé consiste, en général, à utiliser des cellules induisant une différenciation en cardiomyocytes par contact de cellule à cellule. Une différenciation en cardiomyocytes peut avoir lieu par deux moyens : par différenciation spontanée et par différenciation induite. Sans être liés à la théorie, les inventeurs ont émis l'hypothèse selon laquelle, dans le cas de la différenciation induite, des cellules END-2, par exemple, sont nécessaires pour l'agrégation permettant d'engendrer des densités cellulaire locales élevées et pour l'induction de la différenciation du mésoderme naissant. Cette seconde étape peut être améliorée dans une lignée de cellules souches embryonnaires humaines quelconques, ce qui laisse supposer que cela devrait marcher dans des lignées autres que hES. Dans des lignées cellulaires subissant une différenciation spontanée, on émet l'hypothèse qu'une induction locale de corps embryoïdes dans l'édoderme a lieu. En général, pour une différenciation induite, ce procédé consiste également à cultiver la cellule hES avec une cellule excrétant au moins un facteur d'induction de différenciation en cardiomyocytes ou au moyen d'un milieu extracellulaire de celui-ci, dans des conditions induisant une différenciation.
Mummery Christine Lindsay
Passier Robert
Es Cell International Pte Ltd
Sim & Mcburney
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1894721