Improved chimeric glycoproteins and pseudotyped lentiviral...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/86 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/15 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01)

Patent

CA 2484166

The present invention provides improved chimeric glycoproteins (GPs) and improved lentiviral vectors pseudotyped with those glycoproteins. Also provided are methods and compositions for making such glycoproteins and vectors, and improved methods of in vitro and in vivo transduction of cells with such vectors. Improved chimeric GPs encode the extracellular and transmembrane domains of GALV or RDl14 GPs fused to the cytoplasmic tail of MLV-A GP. Vectors pseudotyped with these GAL V /TR and RD 114/TR GP chimeras have significantly higher titers than vectors coated with the parental GPs. Additionally, RDl14/TR-pseudotyped vectors are efficiently concentrated and are resistant to inactivation induced by the complement of both human and macaque sera. RDl14 GP-pseudotyped lentiviral vectors have particular utility for in vivo gene transfer applications.

L'invention concerne des glycoprotéines chimériques améliorées (GP) et des vecteurs lentiviraux améliorés pseudotypés avec ces glycoprotéines. L'invention concerne également des procédés et des compositions permettant de préparer ces glycoprotéines et vecteurs, ainsi que des procédés améliorés de transduction <i>in vitro</i> et <i>in vivo</i> de cellules au moyen de ces vecteurs. Les glycoprotéines chimériques améliorées codent les domaines extracellulaires et transmembranaires des glycoprotéines de GALV ou de RDl14 fusionnées à la queue cytoplasmique de la glycoprotéine de MLV-A. Des vecteurs pseudotypés avec ces chimères des glycoprotéines de GAL V /TR et RD 114/TR possèdent des titres sensiblement supérieurs par rapport à des vecteurs revêtus de glycoprotéines mères. De plus, des vecteurs pseudotypés avec RDl14/TR sont concentrés de manière efficace et résistent à l'inactivation induite par le complément des sérums humain et de macaque. Les vecteurs lentiviraux pseudotypés avec la glycoprotéine de RDl14 sont particulièrement utiles pour des applications de transfert de gènes <i>in vivo</i>.

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