B - Operations – Transporting – 01 – D
Patent
B - Operations, Transporting
01
D
B01D 15/08 (2006.01) B01D 15/36 (2006.01) B01D 15/16 (2006.01) B01D 15/20 (2006.01) B01D 15/22 (2006.01) G01N 30/02 (2006.01) G01N 30/30 (2006.01)
Patent
CA 2375746
An improved separation column and method for separating a mixture of double stranded DNA fragments by Matched Ion Polynucleotide Chromatography. The cylindrical column has an ID greater than about 5 mm and contains polymer beads. The beads have an average diameter of 1 to 100 microns and are unsubstituted polymer beads or are polymer beads substituted with a hydrocarbon moiety having from 1 to 1,000,000 carbons. The preferred beads are characterized by being substantially free from multivalent cations which are free to bind with DNA. The improved column provides enhanced separation of DNA fragments with sizes ranging from about 100 to 20,000 base pairs. The column also provides enhanced separation of heteroduplex and homoduplex DNA molecules in a mutation detection procedure in which the chromatography is performed under conditions effecting partial denaturation of DNA at a site of mismatched base pairs.
L'invention concerne une colonne de séparation améliorée et un procédé correspondant pour séparer un mélange de fragments d'ADN à double brin par chromatographie MIPC. La colonne cylindrique, qui a un diamètre interne supérieur à environ 5 mm, contient des perles de polymère dont le diamètre moyen est compris entre 1 et 100 microns. Il s'agit de perles non substituées ou substituées par une fraction hydrocarbure qui présente entre 1 atome de carbone et un million d'atomes de carbone. De préférence, ces perles sont sensiblement dépourvues de cations multivalents qui peuvent se lier librement avec l'ADN. La colonne améliorée assure une meilleure séparation des fragments d'ADN ayant une taille comprise entre environ 100 et 20 000 paires de base. En outre, cette colonne assure une séparation améliorée pour les molécules d'ADN hétéroduplex et homoduplex dans une procédure de détection de mutation où la chromatographie est accomplie selon des conditions de dénaturation partielle de l'ADN en un site de paires de base présentant un défaut d'appariement.
Gjerde Douglas T.
Haefele Robert M.
Hecker Karl H.
Roque Raquel
Dennison Associates
Transgenomic Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1609521