C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2268368
Improved methods, compositions and kits for detecting mutations in nucleic acids are disclosed, such comprise annealing a piece of control nucleic acid without mutations to a piece of test nucleic acid very similar in sequence to the control nucleic acid but possibly containing mutations, treating this mixture with potassium permanganate or hydroxylamine to remove mismatched bases from the duplex nucleic acid, treating the resulting nucleic acid with any of a class of diamines, triamines, and tetraamines analogous to 1,2- ethylenediamine to cleave abasic sites, and then analyzing the chemically treated nucleic acid to determine whether cleavage has occurred and approximately at what position in the nucleic acid any cleavage has occurred. Inclusion of betaine in the base-removal reactions improves their sensitivity and specificity. This series of non-hazardous, non-noxious, chemical treatments can be performed rapidly in a single reaction tube with no or minimal intervening separation steps; and the cleavage product can be prepared for the analysis step without removing the chemical reagents used to effect cleavage.
L'invention concerne des méthodes, des compositions et des kits améliorés pour la détection de mutations dans des acides nucléiques. Lesdites méthodes consistent à anneler une partie d'acide nucléique de régulation exempte de mutations à une partie d'acide nucléique d'essai très similaire au niveau de la séquence à l'acide nucléique de régulation mais contenant éventuellement des mutations, à traiter ce mélange à l'aide de permanganate de potassium ou d'hydroxylamine de sorte que les bases non appariées de l'acide nucléique duplex soient supprimées, à traiter l'acide nucléique résultant à l'aide d'une des classes parmi les classe de diamines, triamines et tétraamines homologues à 1,2-éhtylènediamine de sorte que les sites abasiques soient clivés, puis à analyser l'acide nucléique traité chimiquement pour déterminer si le clivage a eu lieu et, si c'est le cas, approximativement à quel emplacement le clivage a eu lieu dans l'acide nucléique. L'inclusion de bétaïne dans les réaction de suppression de bases permet d'améliorer la sensibilité et la spécificité desdites réactions. Cette série de traitements chimiques non dangereux et non nuisibles peut s'effectuer rapidement dans un seul tube à essai, avec des phases de séparation intermédiaire minimales voire inexistantes; le produit de clivage peut être préparé pour la phase d'analyse sans retrait des réactifs chimiques utilisés pour le clivage.
Applera Corporation
Perkin-Elmer Corporation The
Sim & Mcburney
LandOfFree
Improved detection of mutations in nucleic acids by chemical... does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Improved detection of mutations in nucleic acids by chemical..., we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Improved detection of mutations in nucleic acids by chemical... will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1845175