Improved e. coli extract for protein synthesis

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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Details

C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2400755

There is now a market for kits containing the necessary components for performing protein synthesis reactions using template DNA of the experimenter. One category of existing system for performing protein synthesis reactions is based on an S-30 extract from the bacteria E. coli. It is disclosed here that a simple fractionation process can dramatically improve the performance of an S-30 prokaryotic protein synthesis reaction mixture. In one embodiment, the fractionation is a simple freezing and thawing of an S-30 extract combined with a supplemental mix, followed by centrifugation. The resulting fractionated S-30 reaction mixture yields more full-length target protein and lessnon-full length or non-target protein than possible using prior art S-30 systems.

Selon cette invention, il existe désormais un marché de kits renfermant les composants nécessaires à la réalisation des réactions de synthèse de protéines au moyen de l'ADN modèle fourni par l'expérimentateur. L'une des catégories du système existant permettant d'effectuer les réactions de synthèse de protéines repose sur un extrait S-30 de la bactérie E. coli. Cette invention révèle qu'un simple procédé de fractionnement peut améliorer de façon significative le rendement d'un mélange réactif de synthèse de protéines procaryotes S-30. Dans un ces modes de réalisation, l'opération de fractionnement consiste en de simples opérations de congélation et de décongélation d'un extrait S-30 associé à un mélange supplémentaire, suivies d'une centrifugation. Le mélange réactif S-30 fractionné ainsi obtenu fournit d'avantage de protéines visées pleine-longueur et moins de protéines non pleine-longueur ou non visées par rapport aux systèmes S-30 de l'état actuel de la technique.

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