G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/576 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/564 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01) C07K 14/18 (2006.01) C07K 16/10 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)
Patent
CA 2324970
The present invention relates to a solid phase immunoassay comprising on said solid phase an antigen in the presence of a reducing agent. The present invention also relates to a method for purifying a cysteine containing recombinantly expressed protein comprising at least 2, preferably 3 or 4 and even more preferably all of the following steps: (a) sulphonation of a lysate from recombinant host cells or lysis of recombinant host cells in the presence of guanidinium chloride followed by a subsequent sulphonation of the cell lysate, (b) treatment with a zwitterionic detergent, preferably after removal of the cell debris, (c) purification of the sulphonated version of the recombinant protein or purification of the sulphonated version of the recombinant protein with subsequent removal of the zwitterionic detergent, with said purification being preferably chromatography, more preferably a Ni-IMAC chromatography with said recombinant protein being a His-tagged recombinant protein, (d) desulphonation of the sulphonated version of the recombinant protein, preferably with a molar excess of DTT, (e) storage in the presence of a molar excess of DTT. The present invention also relates to novel HCV NS3 sequences as depicted in Figures 1-8.
La présente invention concerne un dosage immunologique en phase solide comprenant dans la phase solide un antigène en présence d'un agent réducteur. La présente invention concerne également une méthode de purification d'une cystéine contenant une protéine exprimée par recombinaison comprenant au moins 2, de préférence 3 ou 4 et même idéalement toutes les phases suivantes: (a) sulfonation d'un lysat à partir de cellules hôtes recombinées ou lyse de cellules hôtes recombinées en présence de chlorure de guanidine suivie d'une sulfonation ultérieure du lysat cellulaire; (b) traitement avec un détergent zwitttérionique, de préférence après élimination des débris cellulaires; (c) purification de la version sulfonée de la protéine de recombinaison ou purification de la version sulfonée de la protéine de recombinaison avec élimination ultérieure du détergent zwittérionique, cette purification constituant de préférence une chromatographie et idéalement une chromatographie Ni-IMAC, la protéine de recombinaison étant une protéine de recombinaison à marquage His; (d) désulfonation de la version sulfonée de la protéine de recombinaison, de préférence avec un excès molaire de DTT; (e) conservation en présence d'un excès molaire de DTT. La présente invention concerne également de nouvelles séquences de HCV NS3 telles que décrites dans les dessins 1 à 8.
Bosman Alfons
Louwagie Joost
Maertens Geert
Sablon Erwin
Zrein Maan
Innogenetics N.v.
Smart & Biggar
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2041923