A - Human Necessities – 01 – N
Patent
A - Human Necessities
01
N
A01N 63/00 (2006.01) A01N 63/02 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/32 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/75 (2006.01)
Patent
CA 2419157
The invention relates to nucleic acid sequences comprising a BtI or BtII promoter, or a combination of a BtI and a BtII promoter, at least 6 contiguous nucleotides of a bacterial STAB-SD sequence, and a sequence encoding a polypeptide with at least 80% sequence identity to a 41.9 kD protein of the B. sphaericus ("Bs") binary toxin, which polypeptide has at least 50% of the toxicity of the native 41.9 kD protein. Optionally, the sequence further encodes a second polypeptide with at least 80% sequence identity to the 51.4 kD protein of the Bs binary toxin and which can function as a binding domain for the Bs 41.9 kD toxin protein. When the nucleic acid sequences are expressed in B. thuringiensis ("Bt") or Bs cells, they result in at least 10 times the production of Bs binary toxin compared to untransformed Bs cells. The invention provides nucleic acid sequences, expression vectors, host cells, and methods of increasing the toxicity of an insecticidal bacterium by transforming the bacterium with nucleic acid sequences of the invention. Further, the invention relates to the discovery that the Cyt1Aa1 protein of Bt subspecies israelensis ("Bti") reverses resistance to Bs binary toxin in larvae of Bs-resistant mosquitoes. The invention provides Bs cells expressing Bti Cyt1Aa1 protein, and methods of reducing resistance to Bs binary toxin by co-administering the Cyt1Aa1 protein with Bs binary toxin.
La présente invention concerne des séquences d'acide nucléique comprenant un promoteur Btl ou Btll, ou une combinaison de ces promoteurs, au moins 6 nucléotides contigus d'une séquence bactérienne STAB-SD, et une séquence codante pour un polypeptide dont au moins 80 % de la séquence est identique à une protéine 41,9 kD ou à la toxine binaire B. aphaericus (<=Bs>=), ce polypeptide possédant au moins 50 % de la toxicité de cette protéine native 41.9 kD. Cette séquence est éventuellement également codante pour un deuxième polypeptide dont au moins 80 % de la séquence est identique à la protéine 51.4 kD ou à la toxine binaire Bs et qui peut fonctionner comme un domaine de liaison pour la protéine toxine Bs 41.9 kD. Quand les séquences d'acide nucléique sont exprimées dans des cellules B. thuringiensis ("Bt") ou Bs, elles permettent de produire au moins 10 fois plus de toxine binaire Bs que dans des cellules Bs non transformées. Cette invention concerne aussi des séquences d'acide nucléique, des vecteurs d'expression, des cellules hôtes et des techniques permettant d'accroître la toxicité d'une bactérie insecticide par transformation de cette bactérie avec ces séquences d'acide nucléique. Cette invention concerne encore la découverte que la protéine Cyt1Aa1 des sous espèces de Bt israelensis (<=Bti>=) inverse la résistance à la toxine binaire Bs dans les larves des moustiques résistant à Bs. Cette invention concerne enfin des cellules Bs exprimant la protéine Bti Cyt1Aa1, et des techniques permettant de réduire la résistance à la toxine binaire Bs par l'administration de cette protéine Cyt1Aa1 associée à la toxine binaire Bs.
Bideshi Dennis K.
Federici Brian A.
Hwang Sung-Hei
Park Hyun-Woo
Wirth Margaret C.
Bideshi Dennis K.
Federici Brian A.
Fetherstonhaugh & Co.
Hwang Sung-Hei
Park Hyun-Woo
LandOfFree
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