C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/10 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C12N 9/64 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)
Patent
CA 2220530
A method for obtaining longer cDNA sequences is provided. The method utilizes a known genomic DNA sequence or a partial cDNA sequence, such as can be obtained from GenBank partial cDNAs. Two PCR primers are designed to correspond to the ends of the known partial sequence and to anneal to DNA in a cDNA library so as to initiate extension away from the known cDNA and the other primer. The primers are added to a cDNA library with appropriate enzymes and extend through additional DNA sequence to produce PCR products, which are subsequently purified and sequenced to provide new sequences. The new sequences are then compared with the known partial cDNA sequence for areas of overlap, and the sequence is extended beyond the overlapping areas to provide longer DNA sequence.
L'invention décrit un procédé permettant d'obtenir des séquences d'ADNc plus longues. Ledit procédé fait intervenir une séquence d'ADN génomique connue ou une séquence d'ADNc partiel, telle que celles que l'on peut obtenir à partir d'ADNc partiels de GenBank. Deux amorces d'ACP sont mises au point pour correspondre aux extrémités de la séquence partielle connue et pour s'hybrider à l'ADN dans une bibliothèque d'ADNc afin d'amorcer l'extension loin de l'ADNc connu et de l'autre amorce. Les amorces sont ajoutées à une bibliothèque d'ADNc à l'aide d'enzymes appropriées et s'étendent à travers une séquence d'ADN supplémentaire pour produire des produits d'ACP qui sont ensuite purifiés et séquencés pour donner de nouvelles séquences. Ces nouvelles séquences sont ensuite comparées avec la séquence d'ADNc partiel connue pour trouver des zones de chevauchement, et la séquence est étendue au-delà des zones de chevauchement pour donner une séquence d'ADN plus longue.
Guegler Karl J.
Incyte Pharmaceuticals Inc.
Smart & Biggar
LandOfFree
Improved method for obtaining full-length cdna sequences does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Improved method for obtaining full-length cdna sequences, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Improved method for obtaining full-length cdna sequences will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1404135