C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C07H 1/08 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2317055
The present invention relates to a method for isolating nucleic acid from a sample. Known methods for the isolation of nucleic acid from these materials may comprise the use of a chaotropic substance, for example to lyse cells present in the starting material, and free the nucleic acid therefrom. When a nucleic acid containing material is treated with a chaotrope and contacted with a nucleic acid binding solid phase, the nucleic acid will bind to the solid phase in the presence of the chaotrope and the solid phase with the nucleic acid bound thereto can thus be separated from the remainder of the sample. The method of the present invention for the isolation of nucleic acid from nucleic acid containing starting material is a method wherein the starting material is contacted with a chaotropic substance and, either simultaneously or subsequently, with a nucleic acid binding solid phase, where after the nucleic acid binding solid phase is subjected to a washing procedure and, optionally, the nucleic acid is eluted from the nucleic acid binding solid phase, characterized in that the washing procedure comprises the steps of washing the solid phase with subsequently one ore more high salt buffer solution(s), optionally an alcoholic solution and a low salt buffer solution.
La présente invention concerne un procédé permettant d'isoler de l'acide nucléique d'un échantillon. Les procédés existants permettant d'isoler de l'acide nucléique de ces matériaux impliquent souvent l'utilisation d'une substance chaotrope afin, d'une part de lyser des cellules présentes dans le matériau de départ, et d'autre part d'en libérer l'acide nucléique. Lorsqu'on traite avec un chaotrope un matériau contenant de l'acide nucléique, et qu'on le met au contact d'une phase solide se liant à l'acide nucléique, l'acide nucléique se lie systématiquement à la phase solide en présence du chaotrope, à la suite de quoi la phase solide et l'acide nucléique qui lui est lié peuvent être séparés du restant de l'échantillon. Le procédé de l'invention, qui vise à isoler de l'acide nucléique d'un matériau de départ contenant de l'acide nucléique consiste à prendre le matériau de départ et à le mettre en contact avec une substance chaotrope, puis, soit simultanément, soit successivement, avec une phase solide se liant avec l'acide nucléique. Le procédé consiste ensuite à soumettre à un processus de lavage la phase solide se liant à l'acide nucléique. Le procédé consiste enfin, éventuellement, à faire l'élution de l'acide nucléique à partir de la phase solide se liant à l'acide nucléique. En l'occurrence, ce procédé se caractérise en ce que le processus de lavage comprend des lavages de la phase solide, successivement avec une ou plusieurs solutions tampon hautement saline, éventuellement une solution alcoolique, et une solution tampon faiblement saline.
Klerks Michel Mathijs
Van Gemen Bob
Van Schijndel Harmannus Bernardus
Akzo Nobel Nv
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1426931