C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)
Patent
CA 2143857
The present invention is related to an improved method for the quantification of nucleic acid, which can be performed with a minimal amount of nucleic acid amplification reactions. The method according to the invention for the quantification of analyte nucleic acid in a sample comprises the steps of adding to the sample different respective amounts of different nucleic acid constructs, each construct being distinguishable from the analyte nucleic acid and capable of being co-amplified with the analyte nucleic acid; subjecting the sample to a nucleic acid amplification procedure, using amplification reagents capable of reacting with both the analyte nucleic acid and the nucleic acid constructs; detecting the relative amounts of amplificates derived from analyte nucleic acid and each nucleic acid construct; calculating the amount of analyte nucleic acid from said relative amounts. Each nucleic acid construct is different; the nucleic acid constructs can be distinguished from one another and from the analyte nuclic acid. The nucleic acid constructs do resemble each other, and the analyte nucleic acid, in that all an capable of reacting with the same amplification reagents.
La présente invention se rapporte à un procédé amélioré de quantification de l'acide nucléique qui peut être effectué avec une dose minime déclenchant l'amplification de l'acide nucléique. Selon l'invention, le procédé de quantification de l'acide nucléique d'un analyte dans un échantillon consiste à: ajouter à l'échantillon différentes quantités respectives de produits de recombinaison différents d'acide nucléique, chaque produit de recombinaison pouvant se distinguer de l'acide nucléique de l'analyte et pouvant être co-amplifié avec l'acide nucléique de l'analyte; soumettre l'échantillon à une procédure d'amplification de l'acide nucléique en utilisant des réactifs d'amplification capables de réagir à la fois avec l'acide nucléique de l'analyte et les produits de recombinaison de l'acide nucléique; détecter les quantités relatives d'agents d'amplification dérivés de l'acide nucléique de l'analyte et de chaque produit de recombinaison de l'acide nucléique; calculer la quantité d'acide nucléique de l'analyte à partir de ces quantités relatives. Chaque produit de recombinaison de l'acide nucléique est différent; les produits de recombinaison de l'acide nucléique peuvent se distinguer les uns des autres et de l'acide nucléique de l'analyte. Les produits de recombinaison de l'acide nucléique se ressemblent, et ressemblent aussi à l'acide nucléique de l'analyte, en ce qu'ils sont tous capables de réagir aux mêmes réactifs d'amplification.
Beumer Thomas A. M.
Kievits Tim
Van Beuningen Marinus G. J.
Akzo Nobel Nv
Biomerieux B.v.
Fetherstonhaugh & Co.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2063108