Improved methods and compositions for increasing longevity...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/00 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01)

Patent

CA 2616799

Disclosed are compositions and methods for increasing the longevity of a cell culture and permitting the increased production of proteins, preferably recombinant proteins, such as antibodies, peptides, enzymes, growth factors, interleukins, interferons, hormones, and vaccines. Cells transfected with an apoptosis-inhibiting gene or vector, such as a triple mutant Bcl-2 gene, can survive longer in culture, resulting in extension of the state and yield of protein biosynthesis. Such transfected cells exhibit maximal cell densities that equal or exceed the maximal density achieved by the parent cell lines. Transfected cells can also be pre-adapted for growth in serum-free medium, greatly decreasing the time required to obtain protein production in serum- free medium. In certain methods, the pre-adapted cells can be used for protein production following transformation under serum-free conditions. The method preferably involves eukaryotic cells, more preferably mammalian cells.

L'invention concerne des compositions et des méthodes visant à augmenter la longévité d'une culture cellulaire et permettant d'augmenter la production de protéines, de préférence des protéines de recombinaison, par exemple des anticorps, des peptides, des enzymes, des facteurs de croissance, des interleukines, des interférons, des hormones, et des vaccins. Les cellules transfectées par un gène ou vecteur inhibant l'apoptose, par exemple un triple gène Bcl-2 mutant, peuvent survivre plus longtemps en culture, permettant l'extension de l'état et de la production de la biosynthèse protéique. Les cellules transfectées présentent des densités cellulaires maximales égalant ou dépassant la densité maximale atteinte par les lignées cellulaires parentes. Les cellules transfectées peuvent également être pré-adaptées pour se développer dans un milieu sans sérum, réduisant de manière significative le temps nécessaire pour obtenir la production de protéines dans un milieu sans sérum. Dans certaines méthodes, les cellules pré-adaptées peuvent être utilisées pour la production de protéines suite à la transformation dans des conditions sans sérum. On utilise, de préférence, dans cette méthode, des cellules eucaryotes, et plus préférablement, des cellules mammifères.

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