Improved process for performing polynucleotide separations

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H

Patent

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C07H 21/04 (2006.01) B01D 15/08 (2006.01) C07H 1/00 (2006.01) C07H 1/06 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01)

Patent

CA 2288813

The invention recognizes the deleterious effects of trace, and even undetectable amounts of multivalent cations on the separation of mixtures of polynucleotides, especially double stranded polynucleotides, and provides an improved method for separating such mixtures on wide pore, non-polar separation media by eliminating multivalent cations from the all aspects of the separation process. This is accomplished by using components in the separation process which are materials which do not release metal cations. In addition, the use of cation capture resins and other methods to remove residual traces of multivalent cations from eluting solvents, sample solutions, separation media, and system components is described. It is also important to remove any traces or organic contaminants from solvents solutions and system parts. Taking similar steps to remove residual traces of multivalent cations and organic impurities from the separation process, the invention may also be used in a batch process to separate mixtures of polynucleotides fragments.

L'invention reconnaît les effets nocifs de quantités à l'état de traces et même de quantités non détectables de cations multivalents sur la séparation de mélanges de polynucléotides et plus particulièrement de polynucléotides à double brin, et elle a trait à un procédé amélioré permettant de séparer ces mélanges sur des milieux de séparation non polaires à pores de grandes dimensions au moyen de l'élimination de cations multivalents. Pour cela, on utilise dans le procédé de séparation des constituants qui sont des matières ne libérant pas de cations métal. On décrit également l'utilisation de résines de captage de cations et l'utilisation d'autres procédés pour éliminer les traces résiduelles de cations multivalents dans des solvants d'élution, des solutions d'échantillon, des milieux de séparation et des constituants du système. Il est également important d'éliminer toutes les traces ou tous les contaminants organiques éventuels dans des solutions de solvants et des parties du système. L'utilisation d'étapes similaires pour éliminer dans le processus de séparation les traces résiduelles de cations multivalents et d'impuretés organiques permet à cette invention d'être également utilisée dans un procédé de traitement en lot servant à séparer des mélanges de fragments de polynucléotides.

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