Improved protein expression system

Details Improved protein expression system Improved protein expression system

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/09 (2006.01)

Patent

CA 2727628

Disclosed is a DNA polynucleotide comprising a nucleic acid sequence having promoter activity in a Drosophila S2 cell, where said nucleic acid sequence is selected from (i) a nucleotide sequence of SEQ ID NO 1, SEQ ID NO 2, SEQ ID NO 3, SEQ ID NO 4, SEQ ID NO 5, SEQ ID NO 6, SEQ ID NO 33, SEQ ID NO 36, SEQ ID NO 37, or SEQ ID NO 68 with or without flanking restriction site sequences at either terminus, (ll) a functional nucleotide sequence with a sequence identity of at least 80% to any one sequence of (l), (lll) a nucleotide which is a functional fragment of at least 6 contiguous nucleotides of any one sequence of (l) or (ll), (lV) a functional nucleotide sequence with a sequence identity of at least 80% to said functional frag-ment of (lll), (v) a first chimeric nucleotide sequence comprising two or more sequences of any one sequence of (l), (ll), (lll) and (lv), and (vI) a second chimeric nucleotide sequence, comprising at least 6 nucleotides and including consecutive nucleotide stretches from at least 2 nucleotide sequences of (lll) and/or (lv), where each of said consecutive stretches alone does not have pro-moter activity in a Drosophila S2 cell Also disclosed are vectors and cells comprising the polynucleotide and a method for pro-ducing a polypeptide of interest by use of the polynucleotide

L'invention porte sur un polynucléotide d'ADN renfermant une séquence d'acide nucléique présentant une activité promotrice dans une cellule de Drosophila S2, ladite séquence d'acide nucléique étant choisie parmi (i) une séquence nucléotidique de SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 37 ou SEQ ID NO: 68 avec ou sans séquences flanquantes de site de restriction à l'une ou l'autre extrémité terminale; (ii) une séquence nucléotidique fonctionnelle avec une identité de séquence d'au moins 80 % à l'une quelconque des séquences de (i); (iii) un nucléotide qui est un fragment fonctionnel d'au moins 6 nucléotides contigus de l'une quelconque des séquences de (i) ou (ii); (iv) une séquence nucléotidique fonctionnelle avec une identité de séquence d'au moins 80 % audit fragment fonctionnel de (iii); (v) une première séquence nucléotidique chimère renfermant deux séquences ou plus de l'une quelconque des séquences (i), (ii), (iii) et (iv), et (vi) une seconde séquence nucléotidique chimère, renfermant au moins 6 nucléotides et renfermant des étirements de nucléotide consécutifs à partir d'au moins 2 séquences nucléotidiques de (iii) et/ou (iv), chacun desdits étirements consécutifs seuls ne présentant pas d'activité promotrice dans une cellule Drosophila S2. L'invention porte également sur des vecteurs et des cellules renfermant le polynucléotide et sur un procédé de production d'un polypeptide d'intérêt utilisant le polynucléotide.

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