Improved retroviral vectors, especially suitable for gene...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 15/86 (2006.01) A61K 31/70 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 7/04 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01)

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CA 2218808

The present invention relates to the field of molecular biology, especially recombinant DNA technology, especially concerning retroviral vectors. Retroviral vectors are very suitable vehicles for transferring genetic material of interest into certain cells in so-called gene therapy strategies. However, the retroviral vectors described so far are not ideal. They may give rise to recombination events resulting in helper (pathogenic) virus, they may express viral proteinaceous materials leading to immune responses, etc. These and other drawbacks are overcome by the vectors, cells, kits and methods of the present invention by providing a vector derived from a retrovirus, comprising a sequence responsible for transcriptional control, including an enhancer, which vector further comprises a site for insertion of at least one gene of interest, a packaging signal, said vector having no superfluous retroviral sequences and no open reading frame encoding at least parts of viral proteins, characterized in that the enhancer is an enhancer that is active in undifferentiated cells.

La présente invention se rapporte au domaine de la biologie moléculaire, en particulier à la technologie de l'ADN recombiné, notamment aux vecteurs rétroviraux. Les vecteurs rétroviraux constituent des véhicules appropriés pour transférer un matériel génétique à étudier dans certaines cellules selon des "stratégies de thérapie génique". Cependant, les vecteurs rétroviraux décrits jusqu'à présent ne sont pas idéaux. Ils peuvent donner lieu à des phénomènes de recombinaison qui donnent des virus assistants (pathogènes), et peuvent exprimer des matériels génétiques protéiniques viraux conduisant à des réponses immunitaires, etc. Ces inconvénients, entre autres, peuvent être supprimés au moyen des vecteurs, cellules, nécessaires et procédés de la présente invention, par la création d'un vecteur dérivé d'un rétrovirus, comprenant une séquence responsable de la commande transcriptionnelle, y compris un amplificateur. Ce vecteur comprend en outre un site d'insertion d'au moins un gène à étudier, un signal d'encapsidation, ledit vecteur n'ayant aucune séquence rétrovirale superflue et aucun cadre de lecture ouvert codant au moins des parties des protéines virales, et ledit vecteur étant caractérisé en ce que l'amplificateur est actif dans des cellules indifférenciées.

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