In vitro fertilisation

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – M

Patent

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Details

C12M 3/00 (2006.01) C12N 5/073 (2010.01) C12N 5/075 (2010.01) C12N 5/076 (2010.01)

Patent

CA 2529724

The present invention relates to a method and a system for producing a mammalian pre-embryo and a stem cell having a better quality than prior art methods. The system comprises means for obtaining a mammalian oocyte, and means for obtaining a mammalian spermatozoa, and an apparatus having at least two separate air-tight chambers, for which the oxygen tension of one chamber may be changed independent of the oxygen tension of the other chamber, said at least two separate air-tight chambers constitute a main chamber and at least one residence chamber. The method for in vitro producing a mammalian pre- embryo comprising the steps: a1) providing a mammalian oocyte, a2) providing a mammalian spermatozoa, b) culturing the oocyte and the spermatozoa, c) fertilizing the oocyte with the spermatozoa obtaining a fertilized oocyte, and d) allowing cell-division of the fertilized oocyte obtaining a multicellular pre-embryo wherein at least one of the steps a1) or a2) is conducted at an oxygen tension below 15%, or e) allowing cell-division of the fertilized oocyte obtaining a multicellular pre-embryo, wherein the culture is performed at an oxygen tension allowing cultivation of the cells and wherein at least one of the steps comprises a change in the oxygen tension. Stem cells are produced from the multicellular pre-embryo.

La présente invention concerne un procédé et un système permettant de produire un pré-embryon mammifère et une cellule souche présentant une meilleure qualité que dans les modes de réalisation de l'art antérieur. Le système comprend un moyen permettant d'obtenir un ovocyte mammifère, et un moyen permettant d'obtenir un spermatozoïdes mammifères. L'invention concerne également un dispositif comprenant au moins deux chambres séparées étanches à l'air. La tension en oxygène d'une chambre peut être modifiée indépendamment de la tension en oxygène de l'autre chambre; ces deux chambres séparées étanches à l'air forment une chambre principale et au moins une chambre de séjour. Le procédé décrit dans cette invention comprend les étapes consistant: (a1) à fournir un ovocyte mammifère; (a2) à fournir un spermatozoïde mammifère; (b) à faire une culture de l'ovocyte et du spermatozoïde; (c) à féconder l'ovocyte avec le spermatozoïde de manière à obtenir un ovocyte fécondé; et (d) à permettre la division cellulaire de l'ovocyte fécondé, de manière à obtenir un pré-embryon multicellulaire; au moins l'une des étapes (a1) et (a2) étant réalisée à une tension en oxygène inférieure à 15 %; ou (e) à permettre la division cellulaire de l'ovocyte fécondé, de manière à obtenir un pré-embryon multicellulaire; la culture étant réalisée à une tension en oxygène permettant la culture des cellules et au moins l'une des étapes consistant à modifier la tension en oxygène. Le mode de réalisation décrit dans cette invention permet de produire des cellules souches à partir d'un pré-embryon multicellulaire.

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