In vitro growth of neutrophil and megakaryocyte precursors...

A - Human Necessities – 61 – K

Patent

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Details

A61K 35/14 (2006.01) C12N 5/02 (2006.01) C12Q 1/06 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01) C12N 5/08 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01)

Patent

CA 2168091

The invention provides serum-free, animal protein-free media formulations to be used in conjunction with hematopoietic growth factors for the in vitro growth of human neutrophil and megakaryocyte precursors. The medium is comprised of a base medium, corticosteriod, transferrin, insulin, cholesterol, ethanolamine, and human albumin. The invention also provides methods for preparing serum-free, animal protein-free suspensions of human hematopoietic precursor cells wherein the cellular component comprises at least about 16 % neutrophil precursors and at least about 1 % megakaryocyte precursors. Serum-free, animal protein-free suspensions of human hematopoietic cells are provided wherein the cellular component comprises at least about 30 %, preferably greater than 60 % neutrophil precursors. The neutrophil precursors are comprised of blast cells, promyelocytes, neutrophilic myelocytes, and neutrophilic metamyelocytes. Also provided are serum-free, animal protein-free cell suspensions wherein the cellular component comprises at least about 3 %, preferably greater than 8 % megakaryocyte precursors. Also provided are serum-free, animal-protein free cell suspensions wherein the cellular component comprises colony-forming units and cluster-forming units.

On décrit des compositions de milieux exempts de sérum et de protéines animales, devant être utilisées conjointement avec des facteurs de croissance hématopoiétique pour la croissance in vitro de précurseurs de neutrophiles et de mégacaryocytes humains. Le milieu est composé d'un milieu de base, d'un corticostéroïde, de transferrine, d'insuline, de cholestérol, d'éthanolamine et d'albumine humaine. L'invention concerne également des procédés de préparation de suspensions, exemptes de sérum et de protéines, animales, de cellules précurseurs hématopoiétiques humaines, dans lesquelles le composant cellulaire comprend au moins 16 % environ de précurseurs de neutrophiles et au moins 1 % environ de précurseurs de mégacaryocytes. On décrit des suspensions exemptes de sérum et de protéines, animales, dans lesquelles le composant cellulaire comprend au moins 30 % environ, et de préférence plus de 60 % de précurseurs de neutrophiles. Les précurseurs de neutrophiles comprennent des cellules blastiques, des promyélocytes, des myélocytes neutrophiles et des métamyélocytes neutrophiles. On décrit également des suspensions de cellules exemptes de sérum et de protéines, animales, dans lesquelles le composant cellulaire comprend au moins 3 % environ et de préférence plus de 8 % de précurseurs de mégacaryocytes, ainsi que des suspensions de cellules exemptes de sérum et de protéines animales, dans lesquelles le composant cellulaire comprend des unités formant des colonies et des unités formant des grappes.

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