In vitro method for providing templates for dna sequencing

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)

Patent

CA 2295968

The present invention relates to an in vitro method for providing unique templates for DNA sequencing and to a kit, which can be used, when employing the selection method of this invention. The examined DNA is subjected to a DNA transposition reaction and to an amplification reaction. The amplification reaction is carried out in the presence of a fixed primer and a selective primer having a complementary sequence to the end of a transposon DNA. A transposition reaction can be carried out also in the presence of a transposon or transposons, which have different ends enabling the design of selective primers for both ends. Each size of the amplification products represents one template for a sequencing reaction.

La présente invention concerne une méthode in vitro d'obtention de matrices uniques pour le séquençage d'ADN, ainsi qu'un kit pouvant être utilisé lorsqu'on applique la méthode de sélection de cette invention. L'ADN examiné est soumis à une réaction de transposition d'ADN et à une réaction d'amplification. La réaction d'amplification est exécutée en présence d'une amorce fixe et d'une amorce sélective présentant une séquence complémentaire à l'extrémité d'un ADN à transposon. On peut également effectuer une réaction de transposition en présence d'un ou de plusieurs transposons présentant des extrémités différentes permettant de concevoir des amorces sélectives pour les deux extrémités. Chaque taille des produits d'amplification représente une matrice pour une réaction de séquençage.

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