In vivo selection method for determining inhibitory rna...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) C12N 7/01 (2006.01) C12N 15/86 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01)

Patent

CA 2374664

A selection system suitable for use <i>in vivo</i> is provided, the system comprising: i) a plurality of first nucleotide sequences encoding a gene product capable of binding to and effecting the cleavage, directly or indirectly, of a nucleotide sequence, or a transcription product thereof; wherein a region of the first nucleotide sequence required for binding to the nucleotide sequence is heterogeneous within the plurality of first nucleotide sequences; and ii) a second nucleotide sequence comprising:(a) a coding region encoding a detectable marker operably linked to sequences required for mRNA stability and/or translation; and (b) a third nucleotide sequence positioned between the coding region and at least one of the sequences required for mRNA stability and/or translation; wherein (a) and (b) are operably linked to a regulatory sequence capable of directing expression of (a) and (b) as a contiguous RNA molecule in a host cell.

L'invention concerne un système de sélection indiqué pour une utilisation in vivo et comprenant i) une pluralité de premières séquences nucléotidiques codant pour un produit génétique capable de se lier à et de réaliser un clivage direct ou indirect d'une séquence nucléotidique ou de son produit de transcription ; une zone de la première séquence nucléotidique nécessaire pour lier la séquence nucléotidique étant hétérogène dans la pluralité de premières séquences nucléotidiques et ii) une seconde séquence nucléotidique comprenant (a) une zone de codage codant pour un marqueur détectable lié à des séquences requises pour la stabilité et/ou pour la translation de l'ARNm ; et (b) une troisième séquence nucléotidique placée entre la zone de codage et au moins une des séquences requises pour la stabilité et/ou pour la translation de l'ARNm. Les parties (a) et (b) sont liées à une séquence de régulation capable de commander l'expression de (a) et (b) comme s'il s'agissait d'une molécule d'ARN dans une cellule hôte.

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