C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)
Patent
CA 2380323
A method for identifying a polynucleotide, the expression of which is modulated in the presence of nitric oxide (NO), which method comprises: (i) providing an mRNA or cDNA population from cells which contain a polynucleotide construct, which construct comprises: (a) a promoter operably linked to a coding sequence, wherein the promoter is responsive to ecdysone or an analog thereof and the coding sequence encodes a nitric oxide synthase (NOS) or a functional variant thereof; or (b) a promoter operably linked to one or more tetracycline operator site sequences and a coding sequence in that order, wherein the coding sequence encodes a nitric oxide synthase (NOS) or a functional variant thereof; (ii) providing an mRNA or cDNA population from cells as defined in step (i), said cells having been contacted with ecdysone or an analog thereof; and (iii) comparing the populations of steps (i) and (ii), thereby to determine which polynucleotides show modulated expression in the presence of NO.
L'invention porte sur un procédé d'identification d'un polynucléotide, dont l'expression est modulée en présence de monoxyde d'azote (NO), consistant à: (i) partir d'une population d'ARNm ou d'ADNc de cellules comportant un produit d'assemblage de polynucléotide lequel comprend: (a) un promoteur fonctionnellement lié à une séquence de codage et réagissant à l'ecdysone ou à l'un de ses analogues, ladite séquence codant pour la synthase de monoxyde d'azote (NOS) ou pour l'une de ses variantes fonctionnelles; ou (b) un promoteur fonctionnellement lié à une ou plusieurs séquences de site opérateur de tétracycline et à une séquence de codage dans cet ordre, et codant pour la synthase de monoxyde d'azote (NOS) ou pour l'une de ses variantes; (ii) partir d'une population d'ARNm ou d'ADNc de cellules telle que définie en (i), lesdites cellules ayant été en contact avec de l'ecdysone ou l'un de ses analogues; et (iii) comparer les populations des étapes (i) et (ii), afin de déterminer celui des polynucléotides qui présente une expression modulée en présence de NO.
Charles Ian George
Liu Lizhi
Xu Weiming
Macrae & Co.
University College London
LandOfFree
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