C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/90 (2006.01) A01K 67/02 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) A01K 67/033 (2006.01) C12N 9/22 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2470277
A method of inducing transposition in a transgenic embryo is described, comprising the steps of (a) generating a first adult transgenic organism comprising within its genome one or more copies of a transposon; (b) generating a second adult transgenic organism comprising within its genome one or more copies of a gene encoding a transposase cognate for said transposon and/or a sequence capable of regulating expression of said gene encoding the transposase; (c) crossing the first adult transgenic organism with the second transgenic adult organism to provide a progeny which comprises, in the genome of one or more of its cells, both (i) one or more copies of the transposon and (ii) a gene encoding a transposase cognate for said transposon, wherein the gene encoding the transposase is under the control of one or more inducible regulatory sequences which permit expression of the transposase, and (d) inducing expression of said gene encoding the transposase in said embryo to cause mobilisation of said transposon within at least a portion of the tissues or cells of the progeny. Using the method, mobilisation of a transposon can advantageously be induced at predetermined stages of development of an embryo and the mutated gene of a single cell may be replicated in subsequent cell divisions, resulting in groups of cells which are essentially homogeneous for the transposed gene.
L'invention concerne un procédé pour réaliser une transposition dans un embryon transgénique, comprenant les étapes suivantes : (a) produire un premier organisme transgénique adulte comprenant, à l'intérieur de son génome, une ou plusieurs copies d'un transposon ; (b) produire un second organisme transgénique adulte comprenant, à l'intérieur de son génome, une ou plusieurs copies d'un gène codant une transposase apparenté audit transposon et/ou à une séquence capable de réguler l'expression dudit gène codant la transposase ; (c) croiser le premier organisme transgénique adulte avec le second organisme transgénique adulte pour obtenir une descendance qui comprend, dans le génome d'une ou plusieurs de ses cellules, à la fois (i) une ou plusieurs copies du transposon et (ii) un gène codant une transposase apparenté audit transposon, le gène codant ladite transposase étant sous le contrôle d'une ou plusieurs séquences de régulation inductibles qui permettent l'expression de ladite transposase, et (d) produire l'expression dudit gène codant la transposase dans ledit embryon, afin de provoquer la mobilisation dudit transposon à l'intérieur d'au moins une partie des tissus ou cellules de la descendance. A l'aide de ce procédé, la mobilisation d'un transposon peut être induite de manière avantageuse dans des étapes de développement prédéterminées d'un embryon et le gène mutant d'une cellule simple peut être répliqué dans des divisions de cellules suivantes, ceci permettant l'obtention de groupes de cellules qui sont essentiellement homogènes pour le gène transposé.
Craig Roger
Grosveld Frank
Savakis Charalambos
Erasmus University Medical Center Rotterdam
Minos Biosystems Limited
Smart & Biggar
LandOfFree
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