Inhibitors of memapsin 2 and use thereof

Details Inhibitors of memapsin 2 and use thereof Inhibitors of memapsin 2 and use thereof

C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 14/81 (2006.01) A61K 38/57 (2006.01) A61P 25/28 (2006.01) C07K 1/113 (2006.01) C07K 5/113 (2006.01) C12N 9/64 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01)

Patent

CA 2374346

Methods for the production of purified, catalytically active, recombinant memapsin 2 have been developed. The substrate and subsite specificity of the catalytically active enzyme have been determined. The substrate and subsite specificity information was used to design substrate analogs of the natural memapsin 2 substrate that can inhibit the function of memapsin 2. The substrate analogs are based on peptide sequences, shown to be related to the natural peptide substrates for memapsin 2. The substrate analogs contain at least one analog of an amide bond which is not capable of being cleaved by memapsin 2. Processes for the synthesis of two substrate analogues including isosteres at the sites of the critical amino acid residues were developed and the substrate analogues, OMR99-1 and OM99-2, were synthesized. OM99-2 is based on an octapeptide Glu-Val-Asn-Leu-Ala-Ala-Glu-Phe (SEQ ID NO:28) with the Leu- Ala peptide bond substituted by a transition-state isostere hydroxyethylene group (Figure 1). The inhibition constant of OM99-2 is 1.6 x 10-9 M against recombinant pro-memapsin 2. Crystallography of memapsin 2 bound to this inhibitor was used to determine the three dimensional structure of the protein, as well as the importance of the various residues in binding. This information can be used by those skilled in the art to design new inhibitors, using commercially available software programs and techniques familiar to those in organic chemistry and enzymology, to design new inhibitors to memapsin 2, useful in diagnostics and for the treatment and/or prevention of Alzheimer's disease.

Des procédés de production de memapsine 2 de recombinaison purifiée, catalytiquement active, ont été développés. Les spécificités du substrat et du sous-site de l'enzyme catalytiquement active ont été déterminées. Les spécificités d'information du substrat et du sous-site ont été utilisées pour concevoir des analogues de substrat d'un substrat de memapsine 2 naturelle pouvant inhiber la fonction de la memapsine 2. Les analogues du substrat à base de séquences peptidiques, ont été prouvés comme correspondant à des substrats peptidiques naturels pour la memapsine 2. Les analogues du substrat contiennent au moins un analogue de liaison d'amide ne pouvant pas être clivé par la memapsine 2. Des procédés de synthèse des deux analogues de substrat comprennent des isosthères au niveau des sites des résidus critiques d'aminoacide ont été développés et les analogues du substrat, OMR99-1 et OM99-2, ont été synthétisés. OM99-2 est à base d'octapeptide Glu-Val-Asn-Leu-Ala-Ala-Glu-Phe (SEQ ID NO:28) avec une liaison de peptide Leu-Ala substituée par un groupe hydroxyéthylène isosthère en état de transition (figure 1). L'inhibition constante d'OM99-2 représente 1.6 x 10?-9¿ M contre la pro-memapsine 2 de recombinaison. Une cristallographie de la memapsine 2 liée à cet inhibiteur a été utilisée pour déterminer la structure tridensionnelle de la protéine, ainsi que l'importance des divers résidus de liaison. Cette information peut être utilisée par les personnes qualifiées pour concevoir de nouveaux inhibiteurs, utilisant des programmes logiciels disponibles sur le marché et des techniques familères à ceux qui travaillent dans la chimie organique et l'enzymologie, pour créer de nouveaux inhibiteurs de memapsine 2, utilisés dans les diagnostiques et pour le traitement et/ou la prévention de la maladie d'Alzheimer.

Affiliated with

Also associated with

Rating

Inhibitors of memapsin 2 and use thereof does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.

If you have personal experience with Inhibitors of memapsin 2 and use thereof, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Inhibitors of memapsin 2 and use thereof will most certainly appreciate the feedback.

Rate now

Comments { 0 }

Profile ID: LFCA-PAI-O-2003748