Insect-specific protease recognition sequences

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/32 (2006.01) A01H 1/00 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) A01H 5/10 (2006.01) C07K 14/325 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) A01N 63/02 (2006.01) C12N 9/64 (2006.01)

Patent

CA 2611539

Compositions and methods for protecting a plant from an insect pest are provided. Nucleic acid molecules encoding insect protoxins or insect toxins modified to comprise at least one proteolytic activation site that is sensitive to an insect gut protease are provided. Cleavage of a modified insect protoxin at the proteolytic activation site by an insect gut protease produces an active insect toxin in the gut of the insect pest. Cleavage of a modified insect toxin of the invention at a proteolytic activation site results in the production of an active insect toxin in the insect gut that displays improved pesticidal activity relative to the insect toxin that lacks the proteolytic activation site. Methods of using the modified insect protoxin and modified insect toxin nucleic acid sequences and the polypeptides they encode to protect a plant from an insect pest are provided. Particular embodiments of the invention further provide modified insect protoxin and modified insect toxin compositions and formulations, expression cassettes, and transformed plants, plant cells, and seeds. Insect gut proteases and the nucleic acid molecules that encode them are also disclosed herein.

L'invention concerne des compositions et des procédés pour protéger une plante contre un insecte nuisible. Des molécules d'acide nucléique codant des protoxines d'insecte ou des toxines d'insecte sont modifiées pour comporter au moins un site d'activation protéolytique qui est sensible à une protéase intestinale de l'insecte. Le clivage d'une protoxine d'insecte modifiée au niveau du site d'activation protéolytique par une protéase intestinale d'insecte produit une toxine d'insecte active dans l'intestin de l'insecte nuisible. Le clivage d'une toxine d'insecte modifiée au niveau d'un site d'activation protéolytique entraîne la production d'une toxine d'insecte active dans l'intestin de l'insecte, l'activité pesticide de cette toxine étant supérieure à celle de la toxine d'insecte qui est exempte dudit site d'activation protéolytique. Cette invention concerne également des procédés pour utiliser les séquences d'acide nucléique de protoxine et de toxine d'insecte modifiées, ainsi que les polypeptides encodés par lesdites séquences, pour protéger une plante contre un insecte nuisible. Dans certains modes de réalisation, l'invention concerne en outre des compositions et des formulations comprenant une protoxine et une toxine d'insecte modifiées, des cassettes d'expression, ainsi que des plantes transformées, des cellules de plante, et des semences. La présente invention se rapporte par ailleurs aux protéases intestinales d'insecte, ainsi qu'aux molécules d'acide nucléique qui codent ces dernières.

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