C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C07K 1/04 (2006.01) C07K 7/52 (2006.01) C07K 7/64 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 9/00 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 9/16 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01) C12N 15/55 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C40B 50/00 (2006.01) C40B 50/06 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2355934
Methods of producing cyclic peptides and splicing intermediates of peptides in a looped conformation are disclosed. The methods utilize the trans-splicing ability of split inteins to catalyze cyclization of peptides from a precursor peptide having a target peptide interposed between two portions of a split intein. The interaction of the two portions of the split intein creates a catalytically-active intein and also forces the target peptide into a loop configuration that stabilizes the ester isomer of the amino acid at the junction between one of the intein portions and the target peptide. A heteroatom from the other intein portion then reacts with the ester to form a cyclic ester intermediate. The active intein catalyzes the formation of an aminosuccinimide that liberates a cyclized form of the target peptide, which spontaneously rearranges to form the thermodynamically favored backbone cyclic peptide product. Also disclosed are nucleic acid molecules, polypeptides, methods for making cyclic peptides, methods of making libraries, and methods of screening peptides.
La présente invention concerne des procédés de production de peptides cycliques et d'épissage de peptides dans une conformation en boucle. Les procédés utilisent la capacité de trans-épissage d'intéines fragmentées à catalyser la cyclisation de peptides à partir d'un peptide précurseur comprenant un peptide cible intercalé entre deux parties d'une intéine fragmentée. L'interaction de deux parties d'intéine fragmentée crée une intéine catalytiquement active et force aussi le peptide cible dans une configuration en boucle qui stabilise l'isomère ester de l'acide aminé à la jonction entre une des parties de l'intéine et le peptide cible. Un hétéroatome de l'autre partie d'intéine réagit alors avec l'ester et forme un ester cyclique intermédiaire. L'intéine active catalyse la formation d'un aminosuccinimide qui libère une forme cyclisée du peptide cible, qui se réarrange spontanément en formant le peptide cyclique de configuration thermodynamiquement favorisée. L'invention concerne aussi des molécules d'acides nucléiques, des polypeptides, des procédés de production de peptides cycliques, des procédés de constitution de banques, et des méthodes de criblages de peptides.
Abel-Santos Ernesto V.
Benkovic Stephen J.
Scott Charles P.
Robic
The Penn State Research Foundation
LandOfFree
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